PCR扩增检测

检测项目

DNA浓度检测：测量DNA样本的浓度；具体检测参数包括吸光度260nm，浓度范围0.1-1000 ng/μL。

RNA完整性检测：评估RNA样本的完整性；具体检测参数包括RNA完整性数，范围1-10。

扩增效率检测：评估PCR反应的效率；具体检测参数包括效率百分比，理想值90-110%。

特异性检测：检测扩增产物的特异性；具体检测参数包括熔解曲线分析，Tm值。

灵敏度检测：确定检测下限；具体检测参数包括最低可检测拷贝数，如10 copies/μL。

重复性检测：评估检测的重复性；具体检测参数包括变异系数，小于5%。

污染检测：检测PCR过程中的污染；具体检测参数包括阴性对照结果，应为阴性。

引物二聚体检测：检测引物二聚体的形成；具体检测参数包括电泳条带大小，预期大小。

产物大小验证：验证扩增产物的大小；具体检测参数包括凝胶电泳，大小比较。

定量PCR标准曲线：建立定量PCR的标准曲线；具体检测参数包括R²值，大于0.99。

检测范围

临床样本：用于疾病诊断的样本，如血液和尿液。

环境样本：环境中的微生物检测，如水样和土壤。

食品样本：食品中病原体或转基因成分检测。

法医样本：法医鉴定中的DNA分析。

农业样本：农作物病害检测。

兽医样本：动物疾病诊断。

研究样本：科学研究中的DNA或RNA样本。

工业样本：工业微生物检测。

药品样本：药品质量控制中的微生物检测。

化妆品样本：化妆品微生物污染检测。

检测标准

ISO 22174:2005 食品和动物饲料微生物学 聚合酶链反应检测食源性病原体 通用要求和定义。

GB/T 19495.2-2004 转基因生物及其衍生制品检测 定性PCR方法。

ASTM E1873-06 核酸序列检测的聚合酶链反应技术标准指南。

ISO 20395:2018 生物技术 核酸定量方法验证要求。

GB/T 37871-2019 医药产品微生物检测 PCR法。

检测仪器

热循环仪：用于进行PCR扩增的仪器；具体功能包括控制温度循环，实现DNA变性、退火和延伸。

分光光度计：测量核酸浓度和纯度的仪器；具体功能包括测量260nm和280nm吸光度。

电泳仪：用于分离DNA片段的仪器；具体功能包括通过电场分离DNA，验证产物大小。

实时荧光定量PCR仪：用于实时监测PCR扩增的仪器；具体功能包括检测荧光信号，进行定量分析。

凝胶成像系统：用于捕获和分析电泳凝胶图像的仪器；具体功能包括成像和量化DNA条带。