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非转基因产品等温检测检测

非转基因产品等温检测检测

非转基因产品等温检测针对食品、农产品及饲料中的外源基因片段(如CaMV35S启动子、NOS终止子)、重组蛋白等目标物,采用等温扩增技术(如LAMP、RPA)实现快速检测,具有操作简便、无需高温设备、灵敏度高等特点,是保障非转基因产品标识真实性的重要技术手段。.

检测项目

外源基因片段(CaMV35S启动子):检测非转基因产品中是否含有花椰菜花叶病毒35S启动子基因片段,检测限≤10copies/μL

外源基因片段(NOS终止子):检测根癌农杆菌NOS终止子基因片段,扩增效率≥95%

重组蛋白(Cry1Ab/Ac):检测转Bt基因作物中的Cry1Ab/Ac蛋白,最低检测浓度≤0.1ng/mL

重组蛋白(EPSPS):检测抗草甘膦作物中的5-烯醇式丙酮酸莽草酸-3-磷酸合成酶,交叉反应率≤5%

内源基因(植物):检测植物内源参照基因(如玉米zSSIIb、大豆Lectin),用于验证检测体系有效性,扩增效率变异系数≤3%

内源基因(动物):检测动物源性产品中的内源参照基因(如猪β-actin、牛mitochondrialDNA),检测限≤100pg/μL

转基因成分定性检测:定性判断样品是否含有转基因成分,特异性≥99%

转基因成分定量检测:定量分析样品中转基因成分含量,定量限≤0.1%(质量分数)

等温扩增产物特异性:验证扩增产物的准确性,测序匹配率≥99%

样品基质干扰评估:评估样品中蛋白质、多糖等基质对检测的影响,干扰率≤10%

外源基因片段(FMV35S启动子):检测玄参花叶病毒35S启动子基因片段,检测灵敏度≤10copies/μL

外源基因片段(PAT基因):检测草丁膦抗性基因片段,扩增产物长度≥100bp

检测范围

食用农产品:包括玉米、大豆、水稻、小麦等谷物,以及蔬菜、水果等新鲜农产品,用于验证非转基因标识真实性

加工食品:包括食用油、豆制品、谷物制品、休闲食品等,检测其中是否含有转基因成分

饲料产品:包括配合饲料、浓缩饲料、添加剂预混合饲料等,保障饲料原料的非转基因属性

种子:包括农作物种子、蔬菜种子、花卉种子等,防止转基因种子混入非转基因种子库

植物原料:包括中药材、茶叶、香料等植物源性原料,确保原料未被转基因改造

动物源性产品:包括肉类、蛋类、乳制品等,检测是否含有转基因饲料残留的外源基因或蛋白

食品添加剂:包括食用香精、色素、防腐剂等,验证其原料是否为非转基因来源

化妆品原料:包括植物提取物、油脂等化妆品原料,保障化妆品原料的非转基因属性

生物制品:包括疫苗、诊断试剂等生物制品,防止转基因成分污染

环境样品:包括土壤、水体等环境样品,监测转基因作物的基因漂移情况

饲料原料:包括豆粕、玉米粉、鱼粉等,检测其中转基因成分含量

宠物食品:包括犬粮、猫粮等,保障宠物食品的非转基因属性

检测标准

ISO21569:2005食品中转基因生物及其衍生产品的检测基于核酸的定性方法

ISO21570:2005食品中转基因生物及其衍生产品的检测基于核酸的定量方法

ISO16654:2001食品中转基因生物及其衍生产品的检测抽样方法

GB/T19495.1-2004转基因产品检测通用要求和定义

GB/T19495.2-2004转基因产品检测实验室技术要求

GB/T19495.3-2004转基因产品检测核酸提取纯化方法

GB/T19495.4-2004转基因产品检测定性PCR检测方法

GB/T19495.5-2004转基因产品检测定量PCR检测方法

GB/T38082-2019植物源性食品中转基因成分检测等温扩增法

GB/T39034-2020饲料中转基因成分检测实时荧光等温扩增法

NY/T675-2003转基因植物及其产品检测抽样方法

SN/T1196-2012出口食品中转基因成分检测实时荧光PCR方法

SN/T2584-2010进口转基因农产品检测通用规则

SN/T3169-2012转基因生物及其产品检测通用要求

检测仪器

等温扩增检测仪:基于荧光信号检测的等温扩增反应监测设备,用于实时监测LAMP、RPA等等温扩增反应进程,支持多通道同时检测,荧光检测波长范围450~650nm,检测灵敏度≤10copies/μL

荧光定量PCR仪:用于转基因成分定量检测的荧光信号采集设备,支持实时荧光监测,温度精度0.1℃,通道数≥4,定量线性范围10~10^8copies/μL

核酸提取仪:自动化核酸提取设备,用于从食品、农产品等样品中提取基因组DNA或RNA,支持磁珠法、柱提法等多种提取方式,提取效率≥90%,交叉污染率≤0.1%

生物荧光显微镜:用于观察等温扩增产物的荧光信号,辅助定性检测,放大倍数≥1000,荧光激发波长≥365nm,分辨率≤0.2μm

微量分光光度计:用于检测提取的核酸浓度和纯度,浓度检测范围2~1000ng/μL,纯度(A260/A280)测量精度0.02

恒温金属浴:用于提供等温扩增反应所需的恒定温度,温度范围25~100℃,温度均匀性0.5℃,支持多管同时加热

电泳仪:用于分离和鉴定等温扩增产物,电压范围0~300V,电流范围0~500mA,分辨率≤50bp

凝胶成像系统:用于捕获电泳凝胶的荧光或可见光图像,辅助判断扩增产物大小,像素≥500万,动态范围≥4.5OD

实时浊度仪:用于监测等温扩增反应中的浊度变化(如LAMP反应中的焦磷酸镁沉淀),浊度检测范围0~1000NTU,响应时间≤1s

基因测序仪:用于验证等温扩增产物的特异性,测定基因序列,读长≥150bp,准确率≥99.9%

酶标仪:用于检测重组蛋白的免疫反应信号,支持多波长检测,吸光度范围0~4.0OD,检测灵敏度≤0.01ng/mL

离心机:用于样品预处理中的固液分离,转速范围1000~15000rpm,最大离心力≥18000g