脱氧雪腐镰刀菌烯醇检测

脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）检测技术及应用

简介

脱氧雪腐镰刀菌烯醇（Deoxynivalenol，简称DON），又称呕吐毒素，是一种由镰刀菌属真菌（如禾谷镰刀菌、黄色镰刀菌等）产生的单端孢霉烯族毒素。DON广泛存在于小麦、玉米、大麦等谷物及其制品中，尤其在潮湿、温暖的环境中易滋生。因其具有强烈的细胞毒性、免疫抑制性和致畸性，DON可通过污染饲料和食品链进入人体或动物体内，引发急性中毒或慢性健康危害。世界卫生组织（WHO）和国际癌症研究机构（IARC）已将其列为潜在致癌物。因此，DON的检测对保障食品安全、控制真菌毒素污染具有重要意义。

检测的适用范围

DON检测主要适用于以下领域：

1. 农业与食品加工：对谷物原料、成品粮、饲料及其加工产品（如面粉、啤酒、烘焙食品等）进行污染筛查。
2. 进出口贸易：满足国际食品贸易中关于DON残留限量的要求，例如欧盟规定谷物中DON限量为1250 μg/kg，中国GB 2761-2017规定小麦及制品限量为1000 μg/kg。
3. 公共卫生与市场监管：用于食品安全风险监测、突发中毒事件溯源及日常监督抽检。
4. 科研领域：评估真菌毒素防控技术（如抗病育种、储藏条件优化）的效果。

检测项目及简介

DON检测的核心项目包括：

1. DON含量测定：定量分析样品中DON的浓度，判断是否符合国家或国际标准。
2. 代谢产物检测：如检测DON的衍生物（如3-Ac-DON、15-Ac-DON），评估毒素转化过程及毒性变化。
3. 污染程度评估：结合样品类型（如谷物品种、产地气候）分析污染来源及风险等级。
4. 快速筛查与确证检测：通过初筛方法快速判断阳性样本，再结合高精度仪器进行确证。

检测参考标准

国内外主要参考标准如下：

1. GB 5009.111-2023（中国）《食品安全国家标准 食品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定》
2. ISO 16050:2020（国际）《Cereals and cereal products — Determination of deoxynivalenol content — HPLC method with immunoaffinity column clean-up》
3. EN 15792:2009（欧盟）《Animal feeding stuffs — Determination of deoxynivalenol in animal feed — HPLC method with immunoaffinity column clean-up》
4. AOAC Official Method 986.18（美国）《Deoxynivalenol in Wheat and Corn》

检测方法及相关仪器

DON的检测方法根据技术原理可分为以下几类：

1. 高效液相色谱法（HPLC）

• 原理：样品经提取、净化（如免疫亲和柱）后，通过HPLC分离，紫外检测器（UV）或二极管阵列检测器（DAD）在220 nm波长下测定DON含量。
• 仪器：高效液相色谱仪（如Agilent 1260系列）、免疫亲和柱（如Vicam DONtest®）。
• 特点：灵敏度高（检出限可达50 μg/kg），适用于复杂基质的确证检测。

2. 酶联免疫吸附法（ELISA）

• 原理：利用DON特异性抗体与毒素结合，通过酶标仪测定吸光度值，计算样品浓度。
• 仪器：酶标仪（如BioTek Synergy H1）、ELISA试剂盒（如Romer Labs AgraQuant®）。
• 特点：操作简便、成本低，适合大批量样品的快速筛查（检测限约100 μg/kg）。

3. 液相色谱-质谱联用法（LC-MS/MS）

• 原理：结合色谱分离与质谱定性定量，通过多反应监测（MRM）模式提高检测特异性。
• 仪器：三重四极杆质谱仪（如Thermo Scientific TSQ Altis）、固相萃取装置。
• 特点：灵敏度极佳（检出限可低于10 μg/kg），适用于痕量分析和多毒素同时检测。

4. 胶体金免疫层析法

• 原理：基于抗原-抗体反应，通过试纸条显色快速判断DON是否超标。
• 仪器：便携式读数仪（可选）、胶体金试纸条（如EnviroLogix QuickTox®）。
• 特点：无需专业设备，适用于现场快速检测（半定量结果，检测限约500 μg/kg）。

技术发展趋势与挑战

随着检测需求的提升，DON检测技术正向高通量化、便携化和多毒素联检方向发展。例如，基于纳米材料的传感器技术可在10分钟内完成检测，而多毒素免疫芯片可同时检测DON、黄曲霉毒素等5类毒素。然而，基质干扰（如色素、脂肪）仍是影响检测准确性的主要挑战，未来需进一步开发高效前处理技术。

结语

脱氧雪腐镰刀菌烯醇的检测是食品安全防控体系的重要环节。通过选择适宜的检测方法和标准，结合先进的仪器设备，可有效控制DON污染风险，保障人类健康和国际贸易的顺利进行。随着技术的进步，更快速、精准的检测方案将持续推动行业标准的升级与完善。