aba含量测定

ABA含量测定：从原理到应用的全面解析

简介

脱落酸（Abscisic Acid，ABA）作为植物体内重要的内源激素，在植物生长发育、逆境响应等生理过程中发挥关键作用。其含量变化直接影响植物的气孔开闭、种子休眠、衰老调控等生物学功能。近年来，随着精准农业和植物生理学研究的发展，ABA含量测定技术已成为现代农业科研、作物育种、环境监测等领域的重要检测手段。通过精准测定植物组织或环境样本中的ABA浓度，科研人员能够解析植物生理状态，优化栽培管理方案，为作物抗逆性研究提供数据支撑。

检测适用范围

1. 农业科研领域 用于研究干旱、盐碱、低温等逆境条件下植物ABA的合成规律，评估作物抗逆性品种的选育效果。在精准灌溉系统中，通过监测叶片ABA含量实现水分胁迫的实时诊断。

2. 植物生理研究 解析种子萌发、果实成熟、器官脱落等发育过程中的激素调控网络，为植物生长调节剂开发提供理论依据。

3. 环境监测应用 检测土壤、水体等环境介质中的ABA残留量，评估植物源生长调节物质的环境迁移规律及其生态效应。

检测项目及简介

1. 游离态ABA测定 检测植物组织中具有生物活性的游离态ABA含量，反映植物即时生理状态。样本需经液氮速冻阻断酶活性，防止提取过程中ABA的降解或转化。

2. 结合态ABA分析 测定与糖苷等物质结合的ABA形态，这类储存形式的激素在植物应对持续胁迫时具有缓释调节作用。检测需采用酸水解或酶解法释放结合态ABA。

3. 代谢产物追踪 包括8'-羟基ABA、二氢红花菜豆酸等代谢产物的定量分析，用于研究ABA的分解代谢途径及调控机制。

检测参考标准

1. GB/T 3543-1995 《农作物种子检验规程》中关于内源激素检测的通用技术要求，规范了样本采集与处理的基本流程。

2. ISO 21427-1:2006 《植物激素检测方法 第1部分：脱落酸的液相色谱测定》详细规定了HPLC法检测ABA的色谱条件与质控要求。

3. AOAC 2018.06 《植物组织中脱落酸的LC-MS/MS测定方法》建立了基于串联质谱的高灵敏度检测标准，适用于痕量分析。

检测方法与仪器

主要检测方法

1. 高效液相色谱法（HPLC） 原理：利用C18反相色谱柱分离提取液中的ABA，通过紫外检测器在254nm波长下进行定量分析。 步骤：样本匀浆→甲醇提取→离心浓缩→固相萃取净化→色谱分析。 特点：检测限可达0.1μg/g，适合常规实验室检测，但需注意叶绿素等干扰物质的去除。

2. 酶联免疫吸附法（ELISA） 原理：基于抗原-抗体特异性反应，采用竞争法测定ABA浓度。 步骤：样本提取→包被抗体→竞争反应→显色测定。 特点：灵敏度高达0.01ng/mL，适合大批量样本快速筛查，但存在交叉反应风险。

3. 液相色谱-质谱联用法（LC-MS/MS） 原理：通过分子量及特征碎片离子进行定性定量分析。 步骤：同位素内标添加→超高效液相分离→多反应监测（MRM）模式检测。 特点：检测限达pg级，特异性强，可同时分析多种植物激素。

核心仪器设备

1. Agilent 1260 HPLC系统 配备自动进样器和二极管阵列检测器，支持梯度洗脱程序，配备ChemStation数据处理软件，满足常规检测需求。

2. Thermo TSQ Altis三重四极杆质谱仪 ESI离子源配合APCI电离模式，在负离子模式下对ABA（m/z 263.2→153.1）进行高灵敏度检测，同位素内标法校正基质效应。

3. BioTek Synergy H4酶标仪 ​支持450nm/630nm双波长检测，配合微孔板振荡器，实现96孔板样本的快速ELISA分析。

技术发展展望

随着纳米材料、微流控芯片等新技术的应用，ABA检测正朝着微型化、智能化方向发展。便携式拉曼光谱检测仪可实现田间原位分析，石墨烯量子点荧光探针将检测灵敏度提升至fmol级别。多组学联用技术的突破，使ABA代谢调控网络的系统解析成为可能，为植物逆境生物学研究开辟了新维度。

当前，标准化检测体系的建设仍需加强，特别是不同植物组织基质效应的校正方法、快速前处理技术的开发等关键环节。未来检测技术将更注重实时监测与动态分析能力的提升，推动植物生理研究从静态含量测定向动态代谢调控研究的跨越式发展。