化学发光验证检测

检测项目

化学发光验证检测包含以下核心验证指标：

灵敏度验证：测定最低检测限（LoD）与定量限（LoQ），采用空白样本重复测定法计算均值+3SD确定LoD

线性范围验证：通过5-7个浓度梯度样本建立标准曲线，验证R²≥0.99的线性区间

精密度评估：包含批内精密度（同次实验20次重复）与批间精密度（连续5天实验），要求CV值≤15%

特异性测试：评估交叉反应物质（如结构类似物）及干扰物质（溶血/脂血/胆红素）的影响程度

稳定性研究：涵盖试剂开瓶稳定性、校准品冻融稳定性及反应混合液时效性验证

检测范围

化学发光验证检测适用于以下领域：

临床诊断系统：肿瘤标志物（AFP/CEA/CA系列）、激素（HCG/TSH）、传染病抗体等检测体系验证

生物制药质控：细胞因子（IL-6/TNF-α）、治疗性抗体药物效价测定方法开发验证

环境污染物监测：水体中重金属离子（Hg²⁺/Pb²⁺）、有机磷农药残留的痕量检测

食品安全分析：食品添加剂（亚硝酸盐/苯甲酸）、生物毒素（黄曲霉毒素）快速筛查方法确认

科研实验体系：基于鲁米诺/吖啶酯体系的氧化应激标志物（ROS/RNS）定量方法优化验证

检测方法

主要采用以下方法学验证流程：

标准曲线法：使用NIST可溯源标准品建立6点校准曲线，通过加权最小二乘法进行回归分析

加标回收试验：在空白基质中添加3个浓度水平的待测物，计算回收率（要求85-115%）

干扰试验矩阵设计：按照CLSI EP7-A2指南配制含20种常见干扰物质的测试样本组

动态范围测试：采用多点稀释法确定分析测量范围（AMR）与临床可报告范围（CRR）

携带污染率测定：通过高浓度样本与空白样本交替进样模式评估系统残留影响

检测仪器

关键仪器设备及其技术参数要求：

化学发光分析仪：需具备光子计数模块（PMT响应波长300-650nm），温控精度±0.1℃，典型型号包括Siemens ADVIA Centaur XP、Roche Cobas e801

微孔板读数仪：配备双光路系统（波长范围200-999nm），震荡混匀强度可调（100-1500rpm），如BioTek Synergy H1

恒温孵育器：温度均匀性≤±0.5℃，支持37℃±1℃持续温控8小时以上

精密移液系统：需通过ISO8655认证，液体分装CV值≤1%（10μL量程）

数据采集软件：应具备原始光信号记录功能（采样频率≥10Hz），支持GLP合规性审计追踪

检测流程

确定测试对象与安排：确认测试对象并进行初步检查，确定样品寄送或上门采样安排；

制定验证实验方案：与委托方确认与协商实验方案，验证实验方案的可行性和有效性；

签署委托书：签署委托书，明确测试详情，确定费用，并按约定支付；

进行实验测试：按实验方案进行试验测试，记录数据，并进行必要的控制和调整；

数据分析与报告：分析试验数据，并进行归纳，撰写并审核测试报告，出具符合要求的测试报告，并及时反馈测试结果给委托方。