细胞活力验证检测

检测项目

细胞活力验证检测涵盖五大核心指标：1）细胞存活率定量分析：通过区分活/死细胞比例评估样本质量；2）增殖动力学监测：追踪特定时间段内细胞群体倍增能力；3）代谢活性测定：基于还原酶活性或ATP含量反映细胞生理状态；4）膜完整性检验：检测细胞膜通透性变化及结构损伤程度；5）凋亡与坏死比率测定：鉴别程序性死亡与病理性坏死过程。

检测范围

本检测适用于以下四类研究对象：1）生物医学研究中的原代培养细胞系（如HEK293、HepG2）及干细胞培养体系；2）临床医学领域的肿瘤组织样本（实体瘤穿刺液/血液系统肿瘤悬浮液）；3）生物制药工艺中的工程化改造细胞株（CHO、Vero）；4）毒理学研究涉及的肝微粒体/神经胶质细胞模型。特殊样本需满足最低活细胞浓度≥1×10⁵ cells/mL的检测阈值。

检测方法

标准化操作体系包含三类主流技术方案：

比色法（MTT/CCK-8）：基于线粒体脱氢酶将四氮唑盐还原为甲臜的原理。实验流程包括96孔板接种（密度5×10³-1×10⁴/孔）、37℃孵育试剂4小时及酶标仪450nm波长吸光度测定。该方法适用于高通量药物筛选场景。

荧光染色法（台盼蓝/PI）：利用死细胞膜通透性增强特性进行染色鉴别。操作需严格控制在0.4%台盼蓝终浓度下作用3分钟，血球计数板双盲法统计200个以上细胞。

流式细胞术（Annexin V-FITC/PI双染）：通过磷脂酰丝氨酸外翻与DNA可染性差异区分活细胞/早期凋亡/晚期凋亡/坏死四类状态。需设置FSC/SSC参数排除碎片干扰，获取事件数≥10⁴/样本。

检测仪器

实验系统配置需满足以下技术要求：1）多功能酶标仪（配备450±10nm滤光片及震荡混匀模块）；2）III级生物安全型流式细胞仪（至少配置FL1/FIL2双激光通道）；3）倒置荧光显微镜（具备×100油镜及DAPI/FITC双波段激发光源）；4）自动化细胞计数仪（支持0.1-20μm粒径识别精度）；5）恒温CO₂培养箱（温度波动≤±0.5℃，CO₂浓度控制误差＜1%）。关键设备应通过年度计量校准并保留原始电压参数记录。

检测流程

确定测试对象与安排：确认测试对象并进行初步检查，确定样品寄送或上门采样安排；

制定验证实验方案：与委托方确认与协商实验方案，验证实验方案的可行性和有效性；

签署委托书：签署委托书，明确测试详情，确定费用，并按约定支付；

进行实验测试：按实验方案进行试验测试，记录数据，并进行必要的控制和调整；

数据分析与报告：分析试验数据，并进行归纳，撰写并审核测试报告，出具符合要求的测试报告，并及时反馈测试结果给委托方。