肝细胞增殖速率定量检测

检测项目

细胞周期分析：评估肝细胞在G0/G1、S和G2/M各阶段的分布比例。具体检测参数包括周期阶段百分比和过渡时间。

MTT比色法：测量细胞代谢活性以间接量化增殖速率。具体检测参数包括570nm波长吸光度值和细胞存活率百分比。

BrdU掺入检测：标记DNA合成以识别增殖细胞。具体检测参数包括BrdU阳性细胞百分比和标记指数。

EdU检测：利用点击化学标记新合成DNA。具体检测参数包括荧光信号强度和阳性细胞计数。

Ki-67免疫染色：检测增殖相关抗原表达。具体检测参数包括阳性细胞密度和染色强度指数。

细胞计数法：直接统计肝细胞数量变化。具体检测参数包括总细胞数和倍增时间计算。

集落形成分析：评估肝细胞克隆扩增能力。具体检测参数包括集落大小和形成效率百分比。

流式细胞术DNA含量分析：测定细胞核DNA量以区分周期阶段。具体检测参数包括PI染色荧光强度和直方图峰面积。

CCK-8试剂检测：比色法测量脱氢酶活性。具体检测参数包括450nm吸光度值和相对增殖率。

胸苷类似物掺入：量化DNA合成速率。具体检测参数包括放射性或荧光信号计数和掺入率。

细胞迁移分析：评估增殖伴随的迁移行为。具体检测参数包括伤口愈合距离和迁移速度。

凋亡与增殖比率：结合Caspase检测计算净增殖。具体检测参数包括凋亡细胞百分比和增殖凋亡指数。

检测范围

原代肝细胞培养：从肝脏分离的细胞用于体外增殖动力学研究。

肝组织切片：固定组织样本用于免疫组化增殖标记分析。

肝脏再生模型：部分肝切除动物组织评估再生过程增殖速率。

药物毒性筛选：化合物处理肝细胞检测增殖抑制效应。

肝细胞系：永生化细胞如HepG2用于高通量增殖实验。

肝脏疾病模型：肝炎或纤维化样本研究病理增殖变化。

干细胞分化：肝祖细胞向肝细胞分化过程的增殖监测。

生物材料相容性：支架或涂层材料对肝细胞增殖的影响评估。

基因编辑肝细胞：CRISPR修饰细胞增殖能力定量比较。

肿瘤肝转移样本：癌变肝组织增殖速率异质性分析。

移植肝细胞：评估移植后细胞在宿主体内增殖动态。

环境毒素暴露：污染物处理肝细胞的增殖响应检测。

检测标准

ISO10993-5:2009医疗器械生物学评价第5部分：体外细胞毒性试验。

GB/T16886.5-2017医疗器械生物学评价第5部分：体外细胞毒性试验。

ASTMF2315-18细胞培养标准指南。

ISO19001:2018细胞培养质量控制要求。

GB/T27401-2008实验室质量控制规范。

ISO17025:2017检测和校准实验室能力通用要求。

ASTME2526-22细胞增殖测定标准方法。

GB/T38502-2020体外细胞毒性试验方法。

ISO20391-1:2018细胞计数标准第1部分：细胞计数方法。

GB/T39730-2020生物样本库质量规范。

检测仪器

倒置显微镜：用于实时观察细胞形态和增殖状态。具体功能包括相差或荧光成像以监测细胞分裂。

流式细胞仪：分析细胞周期分布和增殖标记表达。具体功能包括多参数荧光检测以量化周期阶段百分比。

微孔板阅读器：测量比色或荧光信号以评估增殖速率。具体功能包括高通量吸光度或发光值读取。

细胞计数仪：自动统计肝细胞数量和密度。具体功能包括图像分析以计算增殖率。

荧光显微镜：检测增殖相关标记如BrdU或Ki-67。具体功能包括高分辨率成像以定位阳性细胞。

离心机：分离和处理细胞样本。具体功能包括转速控制以维持细胞完整性。

恒温培养箱：提供稳定环境用于细胞增殖培养。具体功能包括温度、湿度和CO2浓度调节。