细菌内毒素鲎试验检测

检测项目

凝胶法限度试验：定性检测内毒素存在，反应终点判定为凝胶形成状态。

动态浊度法：实时监测反应液浊度变化，检测参数为反应时间或内毒素浓度对数线性关系。

显色基质法：通过裂解物酶催化显色反应，测量参数为405nm吸光度变化速率。

终点显色法：孵育后测定固定时间点的吸光度值，计算内毒素浓度。

干扰试验验证：样品与内毒素添加回收率测试，合格标准为回收率50%-200%。

最大有效稀释倍数：消除样品干扰的最大允许稀释比例测定。

标准曲线可靠性：相关系数要求不小于0.980，斜率范围0.6-1.5。

反应灵敏度验证：最低有效浓度标准品测试，需达到标示灵敏度。

样品pH值控制：检测前调整样品pH至6.0-8.0范围。

温度稳定性测试：试剂反应温度维持371℃波动范围验证。

检测范围

注射用水：制药工艺用水内毒素限量控制。

大输液制剂：氯化钠注射液、葡萄糖注射液等终端灭菌产品。

疫苗类制品：病毒载体疫苗及重组蛋白疫苗原液。

植入医疗器械：心脏支架、人工关节等三类器械浸提液。

血液透析器械：透析器及管路系统洗脱液。

生物材料：胶原蛋白、透明质酸等医用材料浸提液。

放射性药品：锝标记显像剂等短半衰期制剂。

眼用制剂：滴眼液及眼内注射药品。

细胞治疗产品：干细胞悬液及免疫细胞制剂。

外科缝合线：可吸收缝合线浸提溶液。

检测标准

国际药典通则2.6.14细菌内毒素检查法

美国药典USP<85>注射剂内毒素测试规范

欧洲药典EP2.6.14内毒素检测通用方法

日本药典JP4.01细菌内毒素试验法

GB/T14233.2-2005医用输液器具内毒素试验

GB/T16886.12-2017医疗器械生物学评价第12部分

ISO10993-11医疗器械生物学评价系统毒性测试

ChP2020版四部通则JianCe3细菌内毒素检查法

ASTMF756-17材料溶血性能评估标准

FDA无菌制剂生产指南附录1内毒素控制

检测仪器

微量分光光度计：动态监测反应体系吸光度变化，波长精度1nm。

恒温孵育系统：维持37℃恒温反应环境，温度波动0.2℃。

动态试管检测仪：实时同步监测多反应管浊度变化。

无热原离心机：样品预处理设备，转速控制范围500-3000rpm。

无热原移液器：液体转移装置，体积误差不大于1%。