霉菌酵母同步分析检测

检测项目

霉菌总数：测定样品中霉菌的总菌落数，反映霉菌污染程度，检测参数：培养温度25-28℃，培养时间5-7天，计数范围10-1000CFU/g（mL）。

酵母总数：测定样品中酵母的总菌落数，评估酵母污染水平，检测参数：培养基采用马铃薯葡萄糖琼脂（PDA），pH值5.6±0.2，计数精度±10%。

霉菌分离鉴定：对样品中优势霉菌菌株进行分离纯化，通过形态学与分子生物学方法鉴定种类，检测参数：采用乳酸酚棉蓝染色观察菌丝与孢子形态，PCR扩增18S rRNA基因片段。

酵母分离鉴定：分离样品中酵母菌株并鉴定种类，检测参数：通过API 20C AUX试剂盒进行生化鉴定，准确率≥95%。

霉菌毒素协同检测：同步分析样品中霉菌代谢产生的毒素（如黄曲霉毒素B1、赭曲霉毒素A），检测参数：采用高效液相色谱-串联质谱法（HPLC-MS/MS），检出限0.1μg/kg。

酵母发酵能力测定：评估酵母对碳水化合物的发酵能力，反映其代谢活性，检测参数：发酵温度30℃，发酵时间24小时，CO₂产量测定精度±5mL。

霉菌耐热性试验：测定霉菌在高温条件下的存活能力，检测参数：处理温度60℃，处理时间30分钟，存活率计算误差≤2%。

酵母耐盐性测试：评估酵母在高盐环境中的生长能力，检测参数：NaCl浓度5-10%，培养时间48小时，生长抑制率计算精度±3%。

霉菌孢子计数：测定样品中霉菌孢子的数量，反映繁殖能力，检测参数：采用血球计数板法，计数范围10³-10⁶个/mL，误差≤5%。

酵母出芽率测定：计算酵母细胞的出芽比例，反映其繁殖活性，检测参数：显微镜下观察≥200个细胞，出芽率统计精度±2%。

霉菌菌丝长度测量：测定霉菌菌丝的生长长度，评估其生长速率，检测参数：培养24小时后，用显微镜测微尺测量，精度0.01mm。

酵母生物量测定：通过干重法计算酵母细胞总量，反映生长状况，检测参数：离心转速8000rpm，干燥温度105℃，误差≤1%。

检测范围

食品类：包括糕点、乳制品、饮料、粮食制品等，评估食品原料及成品的霉菌酵母污染情况。

药品类：涵盖中药饮片、片剂、胶囊剂、液体制剂等，检测药品中霉菌酵母的存在与否及数量。

化妆品类：如面霜、乳液、洗发水、口红等，防止霉菌酵母引起化妆品变质或刺激皮肤。

饲料类：包括畜禽饲料、水产饲料、宠物食品等，保障饲料卫生质量，避免动物摄入污染饲料。

农产品类：如新鲜水果、蔬菜、谷物、油料作物等，监测收获后农产品的微生物污染状况。

饮用水类：包括自来水、瓶装水、桶装水等，检测水中霉菌酵母是否符合卫生标准。

保健食品类：如营养补充剂、功能性饮料等，确保保健食品的微生物指标符合规定。

包装材料类：食品、药品包装用薄膜、纸制品等，检测包装材料是否携带霉菌酵母。

环境样品类：食品生产车间空气、表面擦拭样等，评估生产环境的微生物污染水平。

生物制品类：如疫苗、血清、重组蛋白制品等，防止霉菌酵母污染影响制品安全性。

调味品类：如酱油、醋、酱类等，检测调味品中霉菌酵母的数量，保障食用安全。

婴儿食品类：如婴儿奶粉、米粉、果泥等，严格控制霉菌酵母含量，保护婴儿健康。

检测标准

GB 4789.15-2016 食品微生物学检验 霉菌和酵母计数

ISO 21527-1:2008 食品和饲料微生物 酵母和霉菌计数 第1部分：倾注平板法

GB/T 18204.1-2013 公共场所卫生检验方法 第1部分：微生物学检验

ASTM D4994-15 水和废水的霉菌和酵母计数标准试验方法

ISO 16212:2017 化妆品 微生物学 霉菌和酵母的计数

GB 15979-2002 一次性使用卫生用品卫生标准 附录B 霉菌和酵母计数

ISO 7954:2004 水质 霉菌和酵母的计数 膜过滤法

GB/T 24303-2009 蜂胶中霉菌和酵母的测定

ASTM E1493-01(2018) 食品和饲料中酵母和霉菌计数的标准试验方法

GB/T 31604.39-2016 食品接触材料及制品 霉菌和酵母的测定

检测仪器

霉菌酵母计数仪：用于样品中霉菌和酵母菌落的自动计数，提高计数效率与准确性，具体功能：支持平板图像采集，自动识别菌落形态，计数范围1-1000CFU/平板，误差≤5%。

生化培养箱：提供霉菌酵母生长所需的恒温环境，确保培养条件的一致性，具体功能：温度范围10-40℃，控温精度±0.5℃，湿度调节范围40-90%RH。

高压蒸汽灭菌器：对培养介质、器具等进行灭菌处理，防止杂菌污染，具体功能：工作压力0.1-0.3MPa，灭菌温度121-134℃，灭菌时间可设置1-120分钟。

显微镜：用于霉菌菌丝、孢子及酵母细胞的形态观察与鉴定，具体功能：配备10×、40×、100×物镜，目镜放大倍数10×，分辨率≥0.2μm。

高效液相色谱-串联质谱仪（HPLC-MS/MS）：用于霉菌毒素的同步检测，实现高灵敏度与高特异性分析，具体功能：色谱柱为C18柱（2.1×100mm，1.7μm），质谱采用电喷雾离子源（ESI），检出限≤0.1μg/kg。

聚合酶链反应（PCR）仪：用于霉菌酵母的分子生物学鉴定，扩增目标基因片段，具体功能：温度范围4-99℃，升温速率≥3℃/s，支持多重PCR反应。

血球计数板：用于酵母细胞及霉菌孢子的直接计数，操作简便，具体功能：计数室体积0.1μL，grid划分25×16小格，计数精度±5%。

干燥箱：用于酵母生物量测定中的细胞干燥处理，去除水分，具体功能：温度范围50-200℃，控温精度±1℃，搁板层数≥3层。

离心机：用于酵母细胞的分离富集，去除上清液，具体功能：最大转速10000rpm，最大离心力12000×g，容量≥50mL×6管。

pH计：用于调整培养基的pH值，满足霉菌酵母生长需求，具体功能：测量范围0-14pH，精度±0.01pH，支持温度自动补偿。