紧密连接蛋白表达验证检测

检测项目

免疫组化：组织切片中蛋白定位检测；具体检测参数：染色强度评分系统、阳性细胞百分比计算。

Western blot：蛋白表达定量分析；具体检测参数：条带密度归一化、分子量校准。

免疫荧光染色：荧光标记蛋白共定位；具体检测参数：共聚焦图像分析、荧光强度量化。

实时定量PCR：mRNA表达水平测定；具体检测参数：Ct值计算、相对表达量校准。

酶联免疫吸附试验：可溶性蛋白浓度检测；具体检测参数：吸光度测量、标准曲线拟合。

流式细胞术：细胞表面蛋白表达分析；具体检测参数：荧光标记强度指数、细胞亚群比例。

免疫电镜：超微结构定位；具体检测参数：金颗粒标记密度统计、亚细胞定位验证。

蛋白质质谱：蛋白鉴定及定量；具体检测参数：肽段序列覆盖率、丰度比值计算。

跨膜电阻测量：细胞屏障功能评估；具体检测参数：TEER值变化曲线、电阻稳定性分析。

基因表达芯片：高通量mRNA筛选；具体检测参数：差异表达基因筛选、倍数变化阈值。

原位杂交：RNA定位检测；具体检测参数：杂交信号强度量化、背景噪声校正。

细胞通透性测试：屏障完整性评估；具体检测参数：荧光染料渗透率、时间动态监测。

检测范围

肠道上皮组织样本：肠道屏障功能研究。

皮肤组织切片：皮肤屏障完整性分析。

癌细胞系模型：肿瘤进展相关蛋白表达。

脑微血管内皮细胞：血脑屏障功能验证。

药物毒性测试模型：屏障损伤响应评估。

炎症性肠病组织：疾病状态下蛋白表达变化。

胚胎发育样本：发育过程表达模式追踪。

转基因动物模型：基因修饰效果验证。

临床活检标本：疾病诊断辅助。

Caco-2细胞单层：体外屏障模型应用。

呼吸道黏膜组织：呼吸屏障功能研究。

肝脏细胞培养：药物代谢屏障评估。

检测标准

ISO 15189:2022 Medical laboratories — Requirements for quality and competence.

ISO 17025:2017 General requirements for the competence of testing and calibration laboratories.

GB/T 27401-2008 实验室生物安全通用要求.

GB/T 19596-2017 细胞培养实验室操作规程.

ASTM E2525: JianCe Practice for Testing Fluorescence of Materials.

CLSI EP05-A3 Evaluation of Precision of Quantitative Measurement Procedures.

ICH Q2(R1) Validation of Analytical Procedures: Text and Methodology.

GB/T 30933-2014 实时荧光定量PCR检测方法.

检测仪器

荧光显微镜：高分辨率成像设备；具体功能：免疫荧光染色可视化及图像捕获。

实时荧光定量PCR仪：核酸扩增检测系统；具体功能：实时监测荧光信号并计算Ct值。

流式细胞仪：多参数细胞分析设备；具体功能：细胞表面荧光标记强度测量及分选。

蛋白电泳系统：蛋白分离装置；具体功能：Western blot蛋白分离及转移。

酶标仪：吸光度测量仪器；具体功能：ELISA板孔吸光度读取及数据分析。

共聚焦显微镜：三维成像设备；具体功能：免疫荧光共定位及三维重建。

电镜系统：超微结构观察设备；具体功能：免疫电镜样品成像及定位分析。