细胞裂解液检测

检测项目

总蛋白浓度：检测裂解液中蛋白质总量，反映细胞裂解效率，采用BCA法，测量范围20μg/mL~2000μg/mL，精度±5%。

核酸残留量：检测未去除的DNA/RNA残留，避免干扰下游蛋白分析，采用实时荧光PCR法，检出限1pg/μL。

蛋白酶活性：评估裂解液中蛋白酶对目标蛋白的降解作用，采用酪蛋白底物法（福林酚法），单位U/mL，测量范围0.1~100U/mL，变异系数≤8%。

磷酸酶活性：检测裂解液中磷酸酶对磷酸化蛋白的影响，采用pNPP底物法，波长405nm，比色法测定，精度±3%。

去污剂浓度：检测裂解液中去污剂（如SDS、Triton X-100）含量，确保蛋白溶解性，采用高效液相色谱法（HPLC），测量范围0.01%~10%，分辨率0.001%。

内毒素含量：检测革兰氏阴性菌细胞壁脂多糖残留，避免引起细胞毒性，采用鲎试剂法，符合GB/T 14233.2-2005标准，检测范围0.01~100EU/mL。

重金属残留：检测铅、汞等重金属污染物，采用电感耦合等离子体质谱法（ICP-MS），检出限0.1ng/mL，元素覆盖范围Li~U。

pH值：检测裂解液的酸碱度，影响蛋白稳定性，采用精密pH计，测量范围2~12，精度±0.01pH，支持温度自动补偿。

渗透压：评估裂解液的渗透压，避免细胞胀破或皱缩，采用冰点渗透压计，测量范围10~2000mOsm/kg，精度±1mOsm/kg，样品量≤20μL。

目标蛋白回收率：检测裂解液对目标蛋白的提取效率，采用Western blot法，回收率≥80%，变异系数≤10%。

微生物污染：检测细菌、真菌等微生物污染，采用平板计数法，检出限1CFU/mL，培养时间24~48小时。

检测范围

哺乳动物细胞裂解液：如HEK293、CHO细胞裂解液，用于重组蛋白表达、抗体生产等研究。

细菌细胞裂解液：如大肠杆菌、枯草芽孢杆菌裂解液，用于重组蛋白提取、酶制剂生产等。

酵母细胞裂解液：如酿酒酵母、毕赤酵母裂解液，用于真菌蛋白分析、生物燃料研究等。

植物细胞裂解液：如拟南芥、烟草细胞裂解液，用于植物蛋白功能研究、转基因作物检测等。

昆虫细胞裂解液：如Sf9、Sf21细胞裂解液，用于杆状病毒表达系统、生物农药开发等。

临床样本裂解液：如血液、组织样本裂解液，用于诊断试剂开发、疾病标志物检测等。

病毒裂解液：如腺病毒、慢病毒裂解液，用于病毒蛋白检测、疫苗研发等。

干细胞裂解液：如胚胎干细胞、间充质干细胞裂解液，用于干细胞分化研究、再生医学等。

肿瘤细胞裂解液：如Hela、MCF-7细胞裂解液，用于肿瘤标志物分析、药物筛选等。

重组蛋白裂解液：如融合蛋白、His-tagged蛋白裂解液，用于蛋白纯化前处理、结构生物学研究等。

检测标准

GB/T 38571-2020 生物制品中总蛋白含量测定方法（BCA法、双缩脲法）。

ISO 21571:2005 食品和饲料中核酸残留量的测定 实时荧光PCR法。

GB/T 23527-2009 蛋白酶活性测定方法（福林酚法）。

ASTM E1098-07(2017) 磷酸酶活性的标准试验方法（比色法）。

GB/T 16631-2008 高效液相色谱法通则（用于去污剂浓度测定）。

GB/T 14233.2-2005 医用输液、输血、注射器具检验方法 第2部分：生物学试验方法（内毒素检测，鲎试剂法）。

GB 5009.12-2017 食品安全国家标准 食品中铅的测定（ICP-MS法，重金属残留参考）。

ISO 10523:2008 水质 pH值的测定 玻璃电极法（裂解液pH测定）。

GB/T 6368-2008 表面活性剂 水溶液pH值的测定 电位法（pH值补充）。

ASTM D4542-17 土壤和岩石渗透压的标准试验方法（冰点渗透压计法，渗透压测定）。

GB/T 4789.2-2016 食品安全国家标准 食品微生物学检验 菌落总数测定（微生物污染参考）。

检测仪器

紫外可见分光光度计：用于总蛋白浓度测定（BCA法），波长范围200~1000nm，吸光度精度±0.001A，支持多波长同时测定。

实时荧光PCR仪：用于核酸残留量检测，荧光通道数≥4，检测灵敏度1pg/μL，支持多重PCR反应。

酶标仪：用于蛋白酶活性、磷酸酶活性测定，波长范围400~750nm，微孔板兼容性96/384孔，读板速度≤1秒/孔。

高效液相色谱仪（HPLC）：用于去污剂浓度测定，配备紫外检测器（波长范围190~400nm），流速范围0.1~5mL/min，柱温范围室温~80℃，保留时间重现性≤0.5%。

鲎试剂检测系统：用于内毒素含量测定，符合GB/T 14233.2-2005标准，检测范围0.01~100EU/mL，反应时间≤60分钟，支持自动化操作。

电感耦合等离子体质谱仪（ICP-MS）：用于重金属残留检测，检出限0.1ng/mL，元素覆盖范围Li~U，分辨率≤0.8amu，精密度≤2%RSD。

精密pH计：用于pH值测定，测量范围2~12，精度±0.01pH，支持温度自动补偿（0~100℃），电极响应时间≤30秒。

冰点渗透压计：用于渗透压测定，测量范围10~2000mOsm/kg，精度±1mOsm/kg，样品量≤20μL，检测时间≤2分钟。

Western blot系统：用于目标蛋白回收率测定，包括垂直电泳仪（电压范围0~300V，电流范围0~500mA）、转印仪（转移效率≥95%）、化学发光成像系统（分辨率≤50μm，动态范围≥6个数量级）。

微生物培养箱：用于微生物污染检测，温度范围20~45℃，湿度控制40%~90%，均匀度±1℃，配备可编程定时功能，支持无冷凝运行。