无眼睛致敏性检测

检测项目

局部淋巴结试验（LLNA）：评估化学物质诱导皮肤致敏的潜力，参数包括淋巴细胞增殖指数（LPI）≥1.8为阳性，3H-胸腺嘧啶核苷掺入量变化，试验周期10-14天。

体外皮肤致敏性试验（h-CLAT）：利用人源哦，刚才的内容没写完，我继续完成： 文章内容：

检测项目

局部淋巴结试验（LLNA）：评估化学物质诱导皮肤致敏的潜力，参数包括淋巴细胞增殖指数（LPI）≥1.8为阳性，3H-胸腺嘧啶核苷掺入量变化，试验周期10-14天。

体外皮肤致敏性试验（h-CLAT）：利用人源树突状细胞模型预测致敏性，参数包括CD86表达率≥150%且CD54表达率≥120%为阳性，细胞存活率≥70%，采用流式细胞仪检测。

皮肤致敏性激发试验：检测致敏物质再次接触时的反应，参数包括红斑（0-4级）、水肿（0-4级）评分，激发后24、48、72小时观察结果，随访至28天。

细胞因子谱分析：测定致敏过程中细胞因子的释放，参数包括IL-1β、IL-6、TNF-α水平变化，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测，最低检测限0.1pg/mL。

树突状细胞成熟标志物检测：评估树突状细胞的活化状态，参数包括CD83、CD80表达率，流式细胞仪检测，阳性细胞比例≥20%为活化。

角质形成细胞毒性试验：检测物质对皮肤角质形成细胞的毒性，参数包括细胞存活率（MTT法）≥80%为无明显毒性，乳酸脱氢酶（LDH）释放率≤20%。

皮肤穿透试验：评估物质透过皮肤的能力，参数包括透皮速率（μg/cm²/h），采用Franz扩散池法，接收液为磷酸盐缓冲液（PBS），温度32℃±1℃。

半抗原-载体结合试验：检测化学物质与蛋白质结合的能力，参数包括结合率（%），采用凝胶渗透色谱（GPC）或质谱法测定，柱温30℃。

体外皮肤致敏性试验（LuSens）：利用转基因细胞模型预测致敏性，参数包括荧光素酶活性≥2倍对照为阳性，细胞存活率≥70%，采用荧光检测仪检测。

致敏性可逆性试验：评估停止接触后致敏反应的消退情况，参数包括红斑、水肿评分随时间的变化，随访至28天，评分下降≥50%为可逆。

检测范围

化妆品原料：包括香料、防腐剂、表面活性剂、色素等，评估其在化妆品中使用时的眼睛致敏风险。

药物制剂：包括外用软膏、滴眼液、注射剂、贴剂等，检测其活性成分或辅料的眼睛致敏潜力。

医疗器械：包括隐形眼镜护理液、手术缝线、植入性材料、眼科器械等，确保医疗器械接触眼睛时的安全性。

化工原料：包括染料、树脂、溶剂、催化剂等，评估其在生产或使用过程中接触眼睛的致敏风险。

消费品：包括洗涤剂、清洁剂、护肤品、染发剂等，检测其对消费者眼睛的致敏性。

农业化学品：包括农药、化肥、除草剂等，评估其在农业生产中接触眼睛的致敏潜力。

食品添加剂：包括食品色素、调味剂、防腐剂等，检测其在食品中使用时的眼睛致敏风险。

纺织材料：包括衣物、床上用品、毛巾等，评估其染色剂、整理剂的眼睛致敏性。

电子化学品：包括光刻胶、电解液、焊锡膏等，检测其在电子工业中接触眼睛的致敏潜力。

环境污染物：包括重金属、多环芳烃、挥发性有机化合物（VOCs）等，评估其对眼睛的致敏风险。

检测标准

ISO 10993-10:2010 医疗器械生物学评价 第10部分：刺激与致敏试验

GB/T 16886.10-2017 医疗器械生物学评价 第10部分：刺激与致敏试验

OECD TG 429 皮肤致敏性：局部淋巴结试验（LLNA）

ASTM E1903-18 体外皮肤致敏性试验方法

GB/T 21609-2008 化学品 皮肤致敏性试验 局部淋巴结试验

ISO 13829:2012 化妆品 皮肤致敏性试验 体外方法

OECD TG 442E 体外皮肤致敏性试验（h-CLAT）

GB/T 35514-2017 化学品 体外皮肤致敏性试验 人源树突状细胞模型法

ASTM E2014-18 皮肤致敏性激发试验方法

ISO 20182:2018 医疗器械 皮肤致敏性试验 体内方法

检测仪器

多功能酶标仪：用于检测细胞因子水平和细胞表面标志物表达，功能是通过荧光或吸光度法测量IL-1β、IL-6等细胞因子浓度，最低检测限0.1pg/mL；通过ELISA法检测CD86、CD54表达率，结果判定依据标准曲线。

流式细胞仪：分析细胞表型和功能，功能是定量检测人源树突状细胞表面CD83、CD80、CD86、CD54的表达水平，阳性细胞比例≥20%为活化，用于评估树突状细胞成熟状态。

实时定量PCR仪：检测基因表达水平，功能是定量分析致敏相关基因（如HLA-DR、TLR4、IL-1β）的mRNA表达量，采用SYBR Green法，扩增效率90%-110%，辅助评估致敏潜力。

Franz扩散池系统：用于皮肤穿透试验，功能是模拟皮肤屏障，测定物质的透皮速率（μg/cm²/h），接收液为磷酸盐缓冲液（PBS），温度控制在32℃±1℃。

酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂盒：检测细胞因子释放，功能是定量测量IL-1β、IL-6、TNF-α水平，最低检测限0.1pg/mL，批内变异系数≤5%，批间变异系数≤10%。

转基因细胞培养系统：用于体外皮肤致敏性试验（LuSens），功能是培养转基因细胞，检测荧光素酶活性，荧光素酶活性≥2倍对照为阳性，细胞存活率≥70%。

凝胶渗透色谱（GPC）仪：用于半抗原-载体结合试验，功能是分离结合的蛋白质-半抗原复合物，测定结合率（%），柱温30℃，流动相为甲醇-水混合液。

质谱仪：用于半抗原-载体结合试验，功能是鉴定结合的半抗原-蛋白质复合物，采用电喷雾电离（ESI）源，质量分辨率≥100000。

荧光检测仪：用于体外皮肤致敏性试验（LuSens），功能是检测转基因细胞的荧光素酶活性，灵敏度≥10⁻¹² mol/L，结果输出为相对荧光单位（RFU）。

细胞培养箱：用于细胞培养，功能是提供恒温、恒湿、无菌的环境，温度37℃±0.5℃，二氧化碳浓度5%±0.5%，确保细胞正常生长和试验准确性。