内质网应激PERK通路测试检测

检测项目

PERK蛋白表达水平检测：通过免疫印迹法测量细胞内PERK蛋白总量，检测参数包括定量范围0.1-100 ng和灵敏度0.05 ng。

PERK磷酸化状态测定：评估PERK活化程度的磷酸化率，检测参数采用特异性抗体定量，精度±10%。

eIF2α磷酸化检测：分析下游效应分子的磷酸化水平，检测参数包括免疫荧光定量，范围1-1000 U。

ATF4蛋白表达分析：测量转录因子的表达变化，检测参数使用酶联免疫吸附试验，灵敏度0.01 ng/mL。

CHOP基因表达检测：定量凋亡相关基因的mRNA水平，检测参数基于实时PCR，Ct值范围15-40。

细胞凋亡标记物测定：评估caspase-3活性或Annexin V染色，检测参数包括荧光强度定量，精度±5%。

内质网应激诱导响应测试：监控化学诱导剂处理后的通路激活，检测参数涉及时间曲线绘制，分辨率1分钟。

信号通路激活时间分析：记录PERK磷酸化动态变化，检测参数包括连续采样间隔10分钟。

抑制剂对PERK通路影响评估：测试药理化合物的抑制效果，检测参数使用剂量响应曲线，IC50计算。

基因沉默效率验证：分析siRNA敲除后的剩余表达，检测参数采用Western blot定量，效率范围70-95%。

检测范围

肝脏细胞模型：HEK293细胞系的内质网应激分析。

神经元培养：原代神经元中的PERK通路功能研究。

癌症细胞株：HeLa细胞应激响应评估。

心血管疾病模型：心肌细胞在代谢紊乱下的检测。

神经退行性疾病样本：阿尔茨海默病模型的分子标记分析。

糖尿病代谢紊乱：胰岛β细胞的应激诱导测试。

药物筛选平台：候选化合物的毒性及机制评价。

基因编辑细胞系：CRISPR技术修改后的通路功能验证。

动物组织切片：小鼠肝脏样本的免疫组化检查。

临床活检样本：人类疾病组织的分子水平检测。

检测标准

ISO 17025:2017检测和校准实验室能力通用要求。

GB/T 27401-2008实验室质量控制规范。

ASTM E2690-22细胞培养方法标准指南。

ISO 15189:2012医学实验室质量要求。

GB/T 19000质量管理体系标准。

ISO 10993-1医疗器械生物学评价。

ASTM E2523-13细胞分析方法通用规程。

检测仪器

酶联免疫吸附试验仪：用于蛋白质定量分析，在本检测中测量PERK和ATF4表达水平，检测限0.01 ng/mL。

实时荧光定量PCR系统：进行基因表达分析，在本检测中定量CHOP mRNA，动态范围宽覆盖Ct值10-40。

蛋白质印迹系统：分析蛋白大小及磷酸化状态，在本检测中评估PERK和eIF2α修饰，分辨率高。

流式细胞仪：测定细胞凋亡及表面标记，在本检测中监控caspase-3活性，精度±3%。

细胞培养箱：维持细胞生长环境条件，在本检测中控制温度37°C和CO2浓度5%。

荧光显微镜：观察细胞内蛋白定位，在本检测中用于eIF2α磷酸化可视化，放大倍数40-100x。