实时定量PCR仪检测

检测项目

扩增效率：评估PCR反应中目标序列复制效率，检测参数为效率值范围90-110%。

熔解曲线分析：检测PCR产物特异性，检测参数为熔解温度Tm值。

定量限：确定可检测的最低核酸浓度，检测参数为检测限LOD值。

线性范围：评估定量检测的浓度范围，检测参数为标准曲线的线性相关系数R²。

重复性：测量多次实验的变异程度，检测参数为变异系数CV%。

特异性：区分目标与非目标序列能力，检测参数为无交叉反应确认。

荧光阈值设定：确定阳性信号标准，检测参数为阈值循环Ct值。

引物二聚体检测：评估非特异性扩增，检测参数为二聚体熔解温度。

探针效率：分析荧光探针信号强度，检测参数为荧光强度变化率。

背景荧光校正：扣除非目标荧光干扰，检测参数为背景信号值。

数据分析：解析定量结果，检测参数为相对定量ΔΔCt法。

阳性对照验证：确认反应体系有效性，检测参数为对照样本Ct值范围。

检测范围

病原体检测：检测病毒、细菌等病原体核酸。

基因表达分析：研究基因在不同条件下的表达水平。

转基因检测：鉴定转基因生物或成分。

药物开发：评估药物对基因表达的影响。

食品安全：检测食品中病原体或过敏原。

环境监测：分析水体或土壤中微生物。

法医鉴定：进行DNA指纹分析。

癌症诊断：检测肿瘤标志物表达。

遗传疾病筛查：识别遗传突变或变异。

疫苗研发：评估疫苗诱导的免疫响应。

动物疾病诊断：检测动物病原体感染。

植物育种：分析植物基因型表达差异。

检测标准

ISO20395:2019生物技术核酸定量方法。

GB/T37870-2019分子生物学检测方法通则。

ASTME2186-02a实时荧光PCR标准指南。

ISO/IEC17025检测实验室通用要求。

GB/T27403-2008实验室质量控制规范。

ISO13485医疗器械质量管理体系。

GB/T35428-2017核酸检测试剂盒要求。

ISO15189医学实验室能力准则。

GB/T5750-2006生活饮用水标准检验方法。

ASTMD4447环境样本核酸提取指南。

检测仪器

实时定量PCR仪：热循环和荧光信号检测设备，功能为执行核酸扩增和实时监测荧光变化。

微量分光光度计：核酸浓度测量仪器，功能为定量样本DNA或RNA浓度。

电泳仪：核酸片段分析设备，功能为验证PCR产物大小和纯度。

离心机：样本制备设备，功能为沉淀核酸或分离细胞组分。

自动移液器：精确液体处理设备，功能为添加试剂和混合反应体系。

恒温器：温度控制设备，功能为维持样本储存或反应温度。

数据采集系统：信号记录设备，功能为存储和分析荧光数据。