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微量热泳检测

微量热泳检测

微量热泳检测通过溶液状态下分子迁移率变化分析分子间相互作用,核心参数包括分子尺寸、电荷分布及结合亲和力。该技术适用于蛋白质构象变化、核酸-配体结合等研究领域,检测精度达纳米级别温度分辨率。.

检测项目

结合亲和力常数:测定分子复合物解离平衡常数,检测范围10μM~1nM

化学计量比:确定结合位点比例,分辨率±0.25摩尔当量

热力学参数:测量结合焓变ΔH,精度±5%

分子尺寸变化:监测流体力学半径偏移量,灵敏度0.1nm

电荷状态分析:表征表面电位迁移差异,重复性±2mV

构象稳定性:评估温度诱导变性过程,控温精度±0.1℃

动力学常数:获取结合速率常数k_on,时间分辨率1ms

离子强度效应:检测盐浓度对相互作用的影响,浓度梯度0-500mM

pH依赖性:分析酸碱度对结合能力的作用,pH范围3.0-10.0

协同结合效应:验证多位点结合模型,数据拟合R²>0.98

检测范围

蛋白质-配体复合物:抗体-抗原相互作用表征

核酸适配体:DNA/RNA与小分子结合能力评估

酶-底物系统:催化反应过渡态分析

膜蛋白相互作用:脂质体环境下受体研究

高分子聚合物:共聚物组装行为监测

纳米颗粒表面修饰:配体密度定量分析

疫苗开发:抗原-佐剂结合稳定性测试

药物筛选:化合物库靶标结合初筛

蛋白质错误折叠:聚集过程动力学追踪

细胞因子网络:信号通路分子结合验证

检测标准

ISO/TR 23437:2021生物分子相互作用热泳分析指南

GB/T 40148-2021分子互作检测通用要求

ASTM E3072-22溶液态分子结合特性标准方法

ISO 15197:2013诊断系统性能验证规范

GB/T 16886.5-2017医疗器械生物学评价

检测仪器

微量热泳分析仪:通过红外激光加热建立温度梯度场,实时监测荧光标记分子迁移轨迹

恒温样品台:维持溶液环境±0.02℃温控稳定性,确保热泳力场均匀性

共聚焦荧光检测系统:采集分子迁移信号,空间分辨率0.5μm

自动进样装置:支持96孔板连续检测,进样精度±0.5μL

多波长激光源:提供488nm/640nm双激发波长,适配不同荧光标记物