生工引物合成检测

检测项目

序列准确性检测：验证引物序列与设计要求匹配度，具体检测参数包括错误率≤0.05%、碱基错配数≤1个

纯度检测：测定引物溶液中杂质含量，具体检测参数包括纯度≥95%、有机杂质残留量≤5μg/mg

长度测定：确认引物碱基数量，具体检测参数包括长度误差±1bp、片段分布标准差<0.5%

分子量测定：计算引物相对分子质量，具体检测参数包括分子量偏差±0.01%、质荷比误差±0.1Da

熔解温度检测：评估引物变性特性，具体检测参数包括Tm值准确性±1°C、热稳定性范围50-80°C

二级结构分析：检查引物自身互补性，具体检测参数包括自由能值≤-2kcal/mol、发夹结构发生率<5%

浓度测定：量化引物溶液浓度，具体检测参数包括浓度精度±10ng/μL、吸光度比值A260/A280在1.8-2.0范围

修饰检测：确认化学修饰如荧光标记，具体检测参数包括修饰效率≥90%、标记密度一致性±3%

均一性评估：分析批次间变异，具体检测参数包括批次标准差<0.5%、峰面积RSD<2%

稳定性测试：评估储存条件下降解，具体检测参数包括降解率<2%/月、温度敏感性测试-20°C至25°C

功能性验证：测试PCR扩增性能，具体检测参数包括扩增效率≥95%、非特异性扩增阈值Ct值>30

检测范围

PCR引物：用于聚合酶链反应的短寡核苷酸序列，特异性扩增目标DNA片段

qPCR引物：实时定量PCR应用的特异性引物，支持荧光信号检测

DNA测序引物：桑格测序技术中的起始序列，确保读序准确性

基因编辑引物：CRISPR等系统的向导RNA序列，驱动靶向基因修饰

诊断引物：疾病检测试剂中的特异性探针，识别病原体核酸标志物

研究用引物：实验室分子生物学实验的通用寡核苷酸，支持基础研究

定制引物：按用户需求合成的个性化序列，适用于特定应用场景

高通量引物：大规模测序平台使用的引物混合物，实现并行处理

荧光标记引物：携带荧光基团的检测探针，用于实时成像分析

修饰引物：含硫代磷酸酯等化学修饰的稳定序列，提升核酸酶抗性

RNA引物：逆转录PCR中的起始寡核苷酸，转换RNA为cDNA

检测标准

依据ISO20395:2018进行核酸定量及纯度测试

GB/T19427-2003规范核酸分子量测定方法

ISO17025要求测试实验室能力验证

ASTME2676提供核酸纯度和浓度评估指南

GB/T30996-2014规定分子生物学试剂质量标准

ISO24276涉及食品核酸检测方法

GB/T37871-2019指导生物样本DNA提取流程

检测仪器

毛细管电泳仪：分离核酸片段基于大小和电荷，具体功能包括长度测定、纯度分析及片段分辨率达1bp

紫外可见分光光度计：测量溶液吸光度值，具体功能包括浓度定量、杂质比值计算及波长范围190-800nm

质谱仪：分析分子离子峰，具体功能包括分子量测定、序列确认及质量精度±0.01Da

高效液相色谱仪：分离化合物组分，具体功能包括纯度检测、杂质量化及流速控制0.1-10mL/min

实时荧光定量PCR仪：监测扩增曲线，具体功能包括功能性验证、扩增效率计算及温度梯度测试

核酸分析仪：自动化样品处理，具体功能包括浓度测定、均一性评估及通量支持96孔板格式