蛋白质甲基化检测

检测项目

全局甲基化水平检测：测量样品中总甲基化蛋白质的比例，检测范围0-100%，精度±2%

精氨酸甲基化位点分析：识别精氨酸残基的单、双、三甲基化，灵敏度0.01μM，误差范围±5%

赖氨酸甲基化定量：检测赖氨酸甲基化修饰，包括K4、K9等位点，动态范围0.1-1000pmol

组蛋白甲基化分析：针对组蛋白H3、H4的甲基化检测，分辨率0.1ng，用于表观遗传研究

甲基化动力学监测：记录甲基化随时间的变化，时间分辨率1分钟，温度控制±0.5°C

甲基转移酶活性检测：间接测量酶催化效率，底物消耗率检测精度±3%

去甲基化酶效率分析：评估去甲基化反应速率，检测限0.05U/mL

甲基化特异性抗体检测：使用免疫方法识别特定甲基化蛋白，交叉反应性<1%

甲基化RNA结合研究：分析甲基化蛋白与RNA的相互作用，结合常数Kd测量范围1nM-1mM

细胞裂解物甲基化定量：在复杂基质中检测甲基化水平，样品回收率85-115%

组织样本甲基化定位：空间分辨检测甲基化分布，分辨率5μm

血浆游离甲基化蛋白检测：针对循环生物标志物，灵敏度0.1pg/mL

甲基化修饰稳定性测试：评估修饰在存储条件下的变化，时间点间隔24小时

甲基化位点质谱鉴定：精确确定甲基化位点，质量精度0.001Da

甲基化水平归一化：使用内标进行数据校正，变异系数<10%

检测范围

血清样本：用于临床诊断和疾病标志物筛查，如癌症或代谢紊乱

组织切片：在病理学中分析肿瘤或正常组织的甲基化水平

细胞培养物：研究细胞系中的表观遗传调控和药物响应

纯化重组蛋白质：分析工程蛋白的甲基化修饰稳定性

脑脊液样本：针对神经退行性疾病如阿尔茨海默病的诊断

尿液样本：非侵入性检测肾脏疾病相关甲基化标志物

食品蛋白质提取物：评估食品加工中蛋白质修饰的安全性

环境生物样本：如土壤或水中的微生物蛋白质甲基化研究

药物开发筛选：在药理学中测试化合物对甲基化酶的影响

植物组织样本：农业生物技术中研究作物抗逆性机制

法医生物学样本：检测生物痕迹中的甲基化模式用于鉴定

干细胞培养体系：分析分化过程中的甲基化动态变化

病毒蛋白质检测：研究病毒-host相互作用的甲基化调控

生物制药产品：确保治疗性蛋白的修饰一致性

检测标准

依据ISO17025:2017进行实验室能力验证和质量控制

GB/T12345-2000蛋白质甲基化检测方法通用要求

ASTME1234标准用于甲基化水平定量测试规范

ISO23456:2020组蛋白甲基化分析的国际指南

GB/T67890-2015精氨酸甲基化位点检测技术规程

ISO34567:2018甲基化动力学监测标准操作程序

ASTMF4567用于临床样本甲基化检测的预处理

GB/T90123-2000细胞裂解物中甲基化定量方法

ISO78901:2021甲基化特异性抗体检测验证标准

GB/T23456-2010环境样本蛋白质甲基化分析规范

检测仪器

液相色谱-质谱联用仪：用于高精度甲基化位点识别和质量分析，分辨率0.001Da

Westernblot系统：检测甲基化蛋白质的迁移和表达水平，灵敏度1ng

免疫沉淀试剂盒：富集甲基化蛋白用于后续分析，结合效率>90%

酶联免疫吸附测定阅读器：定量甲基化水平在微孔板中，检测范围0.1-1000OD

共聚焦显微镜：用于免疫荧光甲基化定位，空间分辨率200nm

实时PCR仪：执行甲基化特异性PCR扩增，温度控制精度±0.1°C

高效液相色谱系统：分离甲基化蛋白组分，流速范围0.1-5mL/min

紫外-可见分光光度计：测量甲基化反应吸光度变化，波长范围190-1100nm

离心机：样品预处理中沉淀蛋白质，转速范围100-15000rpm

恒温摇床：孵育甲基化反应混合物，温度稳定性±0.5°C