基因敲除鼠痛敏表型筛查检测

检测项目

热板试验：测量小鼠热刺激潜伏期，温度设定52±0.5°C，记录抬脚时间阈值0.5-30秒，精度0.1秒

尾巴闪避试验：评估尾部热反应，热源温度50°C，反应时间范围50-500毫秒，灵敏度±1%

Von Frey纤维试验：测定机械性痛阈值，纤维丝力值0.008-300g，递增步长0.5g，记录抬脚或缩回行为

福尔马林试验：观察炎症性疼痛，注射浓度5%福尔马林，行为评分系统0（无反应）至3分（强烈舔舐），观察期60分钟

冷板试验：检测冷敏感性，温度范围0-10°C，潜伏期记录10-300秒，分辨率±0.5秒

旋转棒试验：评估运动协调性，转速5-40rpm，跌落时间记录0-600秒，作为痛敏行为对照

自发性疼痛行为评分：量化舔舐或抬脚行为，频率记录0-100次/分钟，持续时间0-120秒，评分标准基于行为强度

神经炎症标记物ELISA：检测血清IL-6水平，灵敏度1pg/mL，线性范围1-1000pg/mL，CV<5%

qPCR基因表达分析：测定TRPV1基因表达，相对定量使用2-ΔΔCt方法，扩增效率90-110%，重复三次

脊髓免疫组化：分析c-Fos神经元活化，切片厚度20μm，抗体稀释1:200，阳性细胞计数范围0-500/切片

检测范围

神经痛基因机制研究：探索特定基因敲除对痛敏通路的影响，用于基础科学验证

镇痛药物筛选平台：评估新化合物在模型中的疗效，支持药理学开发

慢性神经病理性疼痛模型：模拟神经损伤诱导的痛敏，如坐骨神经结扎

炎症性关节炎疼痛：研究类风湿关节炎机制，注射CFA诱导炎症

疼痛遗传易感性分析：探究基因变异与痛阈值相关性，用于遗传学研究

行为神经科学实验：结合痛行为与神经活动记录，解析中枢机制

基础痛阈值测定：提供标准化参数，用于模型验证

神经发育疼痛研究：幼年动物痛敏变化分析，涉及发育阶段

疼痛缓解基因疗法测试：评估靶向基因编辑的止痛效果

疼痛信号传导通路解析：分子机制如离子通道功能研究

检测标准

ISO 10993-11：生物相容性测试指南，疼痛刺激评估标准

GB/T 16886-11：医疗器械生物学评价，疼痛相关试验规范

ASTM F2504：动物模型中痛行为评定标准方法

NIH动物福利指南：疼痛和distress管理要求

GB/T 27416：实验动物质量控制通则，行为测试部分

检测仪器

热板测试仪：恒温控制精度±0.5°C，用于热刺激潜伏期测定，支持自动计时

Von Frey纤维套件：包含尼龙丝阵列，力值范围0.008-300g，用于机械痛阈值测量，应用力递增

行为视频分析系统：高清摄像头与软件追踪，自动识别痛行为如舔舐，帧率60fps

多功能酶标仪：波长范围200-1000nm，用于ELISA检测炎症标记物，吸光度精度±0.005

实时荧光定量PCR仪：温度梯度控制±0.1°C，进行基因表达定量，支持多通道检测