流式细胞ros检测

检测项目

基础ROS水平检测：采用DCFH-DA探针测定静息态胞浆过氧化物，检测灵敏度5nM，线性范围0-100μM

超氧阴离子定量：Hydroethidium探针特异性检测O₂⁻，激发/发射波长518/605nm，分辨率±0.5%

线粒体超氧化物检测：MitoSOX Red标记，需同步进行线粒体膜电位校正，检测限10³细胞/样本

过氧化氢动力学分析：HyPer探针实时监测H₂O₂代谢，时间分辨率达15秒/周期

羟基自由基捕获检测：HPF探针特异性识别·OH，避光操作要求≤50lux

NADPH氧化酶活性：DHE衍生物结合抑制剂对照，活性单位定义U/10⁶cells

抗氧化能力评估：Trolox当量法测定SOD/CAT清除效率，温度控制37±0.5℃

氧化损伤标志物：8-OHdG定量检测DNA损伤，样本需DNase I预处理

双参数同步检测：DCFH-DA/PI双染排除死细胞干扰，补偿校正误差≤2%

细胞内定位分析：共聚焦流式通道定位胞器ROS，Z轴分辨率0.5μm

检测范围

免疫细胞氧化爆发：中性粒细胞吞噬过程ROS释放动力学监测

肿瘤耐药机制研究：化疗药物诱导的癌细胞氧化应激响应曲线

神经退行性疾病模型：β淀粉样蛋白引发的神经元氧化损伤评估

心血管药物筛选：他汀类药物对血管内皮细胞ROS的调控作用

干细胞培养优化：低氧微环境重编程过程的氧化还原电位监测

环境污染评估：PM2.5暴露下肺泡巨噬细胞ROS生成速率测定

农业生物胁迫响应：植物病原体侵染过程中的活性氧爆发检测

食品抗氧化剂效价：多酚类物质清除自由基能力标准化测试

辐射生物学研究：电离辐射诱导DNA氧化损伤的剂量效应分析

衰老机制研究：端粒缩短关联的线粒体ROS累积定量模型

检测标准

ISO 10993-5：医疗器械生物相容性测试的ROS检测规范

ASTM E2526：流式细胞术荧光探针校准通用要求

GB/T 35816：哺乳动物细胞氧化应激检测技术通则

CLSI H56-A：临床流式细胞术氧化标志物检测指南

OECD 432：体外皮肤模型光毒性ROS评估准则

GB/T 39134：细胞抗氧化能力测定方法

ISO 21427：水质遗传毒性检测的SOS/ROS联合分析法

EP 2.6.27：欧洲药典细胞疗法产品氧化应激质控标准

检测仪器

多激光流式细胞仪：配置405/488/640nm激光器，实现八色同步检测，支持时间分辨荧光采集

活细胞成像系统：集成CO₂温控模块，支持72小时连续ROS动力学成像

高通量微孔板检测仪：96孔板同步扫描能力，配备635nm参比光路校准

激光共聚焦流式细胞仪：具备空间分辨功能，实现亚细胞器水平ROS定位

全自动细胞处理平台：集成探针装载、洗涤及终止反应模块，CV值≤3%

光谱流式细胞仪：32通道全光谱解析，有效区分DCF/PI发射光谱重叠

微流控单细胞分析芯片：纳升级反应腔室设计，支持单细胞ROS分泌追踪