需氧菌精密度试验检测

检测项目

培养基批次一致性验证：通过连续三批次无菌培养基的空白对照试验，控制pH范围7.2±0.2，凝胶强度≥300g/cm²

菌悬液浓度标定：采用麦氏比浊法校准菌液浓度，要求枯草芽孢杆菌ATCC6633悬液浊度0.5McFarland±5%

重复性试验：同一操作者6次平行接种，计算RSD≤5%（菌落数10²~10³CFU/mL区间）

重现性试验：三名操作者独立完成双平板计数，组间变异系数CV≤10%

稀释梯度验证：10倍系列稀释液偏差控制≤0.1log值

培养温度稳定性：恒温培养箱32.5℃±1.0℃持续监控72小时

菌落计数允差：双平板差异＜15%（30~300CFU/平板范围）

培养基促生长能力：金黄色葡萄球菌ATCC6538回收率≥70%

抑制剂干扰试验：含样品基质时标准菌株回收率波动范围85%~115%

时效性验证：接种后平板在20~25℃转运时效≤30分钟

检测范围

制药工业无菌制品：注射用水、大输液产品的微生物限度检验

医疗器械灭菌验证：手术器械、植入物包装的无菌保证测试

化妆品原料检测：乳化剂、防腐剂等原料的微生物负载分析

食品接触材料：塑料包装、纸制容器的卫生学评价

生物制品生产：细胞培养基、缓冲溶液的生物负荷监控

环境监测：洁净室沉降菌、浮游菌的定量测定

药用辅料质量控制：淀粉、明胶等天然物质的微生物检验

实验室耗材验证：滤膜、培养皿的促生长性能测试

水系统监测：纯化水、注射用水系统的日常微生物检测

中药制剂安全评价：口服液、膏剂的需氧菌总数测定

检测标准

ISO 11737-1:2018 医疗产品灭菌-微生物方法-第1部分：产品上微生物总数的测定

USP <61> 非无菌产品的微生物检查：需氧菌总数计数

GB 4789.2-2022 食品安全国家标准 食品微生物学检验 菌落总数测定

EP 2.6.12 欧洲药典 非无菌产品微生物检查

ISO 4833-1:2013 食品和动物饲料的微生物学-菌落计数技术

GB/T 19973.1-2023 医疗器械的灭菌 微生物学方法 第1部分：产品上微生物总数的确定

JP 4.05 日本药局方 微生物限度试验法

ASTM E2315-2016 定量表面取样中微生物回收率测定指南

YY/T 0615.1-2019 医疗器械灭菌过程挑战菌群要求

ISO 11133:2014 微生物培养基的制备、生产、储存和性能测试

检测仪器

全自动菌落计数仪：采用高分辨率CCD成像系统识别0.5~5mm菌落，计数精度±3%

恒温振荡培养箱：维持32.5℃±0.5℃培养温度，振动频率150rpm±5rpm

微生物过滤装置：配备0.45μm孔径滤膜，过滤压力-80kPa±5kPa

激光粒径分析仪：测定菌悬液粒子分布，D50值控制1.0~3.0μm

无菌均质器：实现样品高速破碎（8000rpm~30000rpm可调），处理时间≤2分钟

生物安全柜：维持ISO 5级洁净度，风速0.45m/s±0.05m/s

pH计：测量培养基酸度，精度±0.01单位

恒温水浴锅：维持稀释液45℃±1℃保温状态

电子天平：称量样品精度0.001g，符合GLP校准规范

微生物定量接种环：10μL容量，误差范围±0.5μL