微生物限度阈值分析检测

检测项目

需氧菌总数计数：定量检测每克/毫升样品中好氧及兼性厌氧菌总数，报告单位为CFU/g或CFU/mL

霉菌和酵母菌总数测定：采用玫瑰红钠琼脂培养基，培养温度23-28℃持续5-7天

耐胆盐革兰阴性菌检测：使用肠道菌增菌液体培养基，培养温度30-35℃持续24-48小时

大肠埃希菌筛查：采用麦康凯液体培养基，44.5℃培养24小时后转接EMB琼脂平板

沙门菌属检测：通过缓冲蛋白胨水预增菌，转接RV沙门菌增菌液，培养温度30-35℃

铜绿假单胞菌鉴定：使用溴化十六烷基三甲铵琼脂平板，菌落形态观察结合氧化酶试验

金黄色葡萄球菌检测：甘露醇氯化钠琼脂培养，辅以血浆凝固酶验证试验

梭菌计数：在厌氧条件下使用 reinforced clostridial medium 培养，温度35℃持续72小时

白色念珠菌鉴定：沙氏葡萄糖琼脂培养后，通过芽管形成试验确认

黑曲霉检测：采用含氯霉素的沙氏琼脂，28℃培养5天后镜检分生孢子结构

无菌检查方法验证：包括薄膜过滤法验证回收率，冲洗量100-500mL/膜

控制菌检查：涵盖特定致病菌的检出限验证，定量限需达10CFU/样品

检测范围

注射用原料药：包括无菌制剂原料、辅料及中间体，需控制细菌内毒素

口服固体制剂：片剂、胶囊剂、颗粒剂等成品及包材，需满足非无菌产品微生物限度

医疗器械：创口敷料、导管、手术器械等产品表面及管腔生物负荷测试

化妆品原料：油脂、乳化剂、活性成分的需氧菌总数及致病菌筛查

医用纱布制品：包括脱脂棉、绷带等材料的初始污染菌检测

食品包装材料：直接接触食品的塑料、纸质包装微生物屏障性能验证

生物制品原液：细胞培养上清液、疫苗半成品等生产过程控制

纯化水系统：制药用水点微生物监控，检测频率按风险等级确定

中药材及饮片：依据《中国药典》进行沙门菌、黄曲霉毒素关联菌检测

药用辅料：如羟丙甲纤维素、硬脂酸镁等流动性粉末的霉菌控制

体外诊断试剂：校准品、质控品等生物材料负载菌量测定

一次性卫生用品：卫生巾、纸尿裤等产品的细菌菌落总数限定

检测标准

中国药典通则1105/1106：非无菌产品微生物限度检查法及控制菌检查法

GB 15979-2002：一次性使用卫生用品卫生标准微生物指标部分

ISO 11737-1：医疗器械灭菌微生物学方法菌落计数标准

USP <61> <62>：美国药典微生物限度试验及特定微生物检测章节

EP 2.6.12/2.6.13：欧洲药典微生物总量检测及特定病原体测试规范

ISO 21148：化妆品微生物学检测通用指南

GB/T 19973.1：医疗器械生物负载测定参考方法

ISO 11133：培养基质量控制及性能测试标准

GB 4789.2：食品国家安全标准菌落总数测定

JP 4.05：日本药局方微生物限度试验法

ISO 18593：食品接触表面微生物采样技术规范

检测仪器

生物安全柜：提供ISO Class 5环境，保障样品处理过程无菌防护

膜过滤装置：配备0.45μm孔径滤膜，实现液体样品微生物富集

微生物培养箱：温度范围20-60℃，精确度±0.5℃，支持多段程序控制

菌落计数器：自动识别直径0.1-15mm菌落，具备荧光标记识别功能

PCR检测系统：用于特定病原菌快速筛查，检测限达10CFU/mL

蒸汽灭菌器：温度监控点≥6个，满足GB 8599热穿透测试要求

微生物鉴定仪：基于MALDI-TOF质谱技术，实现菌株快速鉴定

洁净工作台：垂直单向气流，符合ISO 14644-1 Class 7标准

自动接种仪：精确接种量0.1-1mL，变异系数≤2%

快速微生物检测系统：基于ATP生物发光法，5分钟内获得生物负载数据