医院的微生物检测

检测项目

无菌检验：依据药典要求，采用薄膜过滤法或直接接种法，培养14天监测需厌氧菌及真菌生长，阳性对照菌株为生孢梭菌、金黄色葡萄球菌等。

细菌总数测定：营养琼脂倾注培养（36±1℃, 48h），报告单位为CFU/g/mL/cm²，医疗用品限值≤20CFU/g（非无菌产品）。

致病菌筛查：沙门氏菌（TTB/SC增菌→XLD分离），铜绿假单胞菌（NAC培养基验证氧化酶/42℃生长），金黄色葡萄球菌（Baird-Parker琼脂→凝固酶试验）。

真菌定量检测：沙氏葡萄糖琼脂培养（25±2℃, 5-7天），医疗器械表面限值≤1CFU/cm²。

内毒素检测：鲎试剂动态浊度法（LAL），检测下限0.001EU/mL，注射用水限值0.25EU/mL。

抗菌药物敏感试验：CLSI M100标准，KB法误差±1mm，MIC法梯度浓度涵盖0.016-256μg/mL。

厌氧菌培养：厌氧产气袋（O₂≤1%），诊断菌血症需5-7天血培养阳性报警。

病毒核酸检测：实时荧光PCR，Ct值≤38判阳性，HIV/HBV/HCV检测灵敏度≥50IU/mL。

生物指示剂验证：嗜热脂肪芽孢杆菌（ATCC7953）≥1×10⁶CFU/片，D值1.5-3.0分钟（121℃）。

空气微生物监测：沉降法（φ90mm平皿暴露30min）或撞击法（100L/min流量），手术室动态≤4CFU/皿。

检测范围

植入性医疗器械：骨科螺钉、心脏瓣膜等，需通过ISO11737无菌试验及微粒污染检测。

注射制剂：大输液、疫苗等，检测细菌内毒素（凝胶限量法）及可见异物（光阻法≥10μm）。

手术器械包：压力蒸汽灭菌后验证嗜热脂肪芽孢杆菌杀灭率（BI培养56℃, 24h）。

透析液及置换液：按YY0572标准，菌落总数≤100CFU/mL，内毒素≤0.5EU/mL。

医用敷料：烧伤纱布等，检测铜绿假单胞菌、溶血性链球菌等特定致病菌。

洁净区域监测：ICU/手术室墙面/台面，Rodac接触碟法（55mm平皿）采样25cm²。

医护人员手卫生：GB15982规范，五指并拢涂抹采样，细菌总数≤5CFU/cm²。

医疗用水系统：反渗水/纯化水每周检测，电导率≤1.3μS/cm（25℃），铜绿假单胞菌不得检出。

病理组织标本：分枝杆菌抗酸染色（Ziehl-Neelsen法），脱蜡组织PCR检测HPV16/18型。

医疗废物消毒：感染性废物验证灭菌效果，枯草杆菌黑色变种（ATCC9372）芽孢杀灭对数值≥4。

检测标准

ISO11737-1:2018 灭菌医疗器械微生物计数法

GB/T19973.1-2015 医疗器械灭菌微生物学方法

CLSI M07-A11 需氧菌稀释法药敏试验

ISO14698-1 洁净室微生物污染控制

GB15982-2012 医院消毒卫生标准

ISO11138-1:2017 生物指示剂通用要求

EP2.6.27 欧洲药典细胞因子检测

GB4789.4-2016 沙门氏菌检验

YY/T0615.1-2019 医疗器械标识标签

ISO21528-2:2017 肠杆菌科计数

检测仪器

二级生物安全柜（BSC-ⅡA2型）：进气流速0.53m/s±20%，HEPA过滤器对0.3μm颗粒截留率99.99%，保障操作人员与环境安全。

全自动微生物鉴定系统：VITEK 2 Compact支持≥50种生化反应，GN卡鉴定革兰阴性菌准确度≥95%，药敏测试覆盖18类抗生素。

实时荧光定量PCR仪：配置FAM/HEX/VIC多重通道，温控精度±0.1℃，扩增效率90-110%，完成HBV DNA定量检测（线性范围10¹-10⁸ IU/mL）。

基质辅助激光解吸飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）：微生物鉴定速度＜1分钟/样本，质量范围2-20kDa，数据库涵盖＞3000种病原微生物。

全自动血培养系统：采用荧光增强检测技术，阳性报警时间≤12小时（大肠埃希菌），培养瓶容量40mL，支持需氧/厌氧/儿童多规格培养。