微生物的无菌检测

检测项目

培养基适用性检查：验证培养基促生长能力，需满足枯草芽孢杆菌24小时内复苏率≥70%

直接接种法无菌试验：样品植入硫乙醇酸盐流体培养基，培养温度32.5±2.5℃，观察14天微生物生长

薄膜过滤法无菌试验：使用0.45μm孔径滤膜，冲洗量500mL/膜，培养温度同环境控制要求

生物指示剂挑战试验：采用嗜热脂肪芽孢杆菌孢子，存活量要求10⁶ CFU/载体，D值1.5-3.0分钟

器械腔体无菌测试：模拟使用状态注入培养基，灭菌后培养温度23±2℃持续21天

抑菌性产品中和验证：添加卵磷脂吐温80中和剂，中和效率验证需达90%以上

包装完整性微生物挑战：使用缺陷包装接种粘质沙雷菌，检测灵敏度1CFU/0.1mL

无菌隔离器验证：沉降菌采样4小时，接触碟采样25cm²，浮游菌采样1m³

终产品抽样方案：依据GB/T 2828.1 AQL 0.65%，批量≤200时取样量20个单位

环境微生物监测：洁净区浮游菌采样量1000L/点，沉降碟暴露时间≤4小时

检测范围

注射类药品：包括小容量注射液、粉针剂、输液产品等终端灭菌制剂

植入医疗器械：心脏支架、人工关节等三类器械产品无菌保证测试

生物制品：疫苗、血液制品、细胞治疗产品的无菌放行检测

外科敷料：手术缝合线、止血海绵等一次性医用材料的无菌验证

眼用制剂：滴眼液、眼膏等直接接触眼部组织的无菌产品

无菌包装材料：医疗器材初包装的微生物屏障性能验证

组织工程产品：人工皮肤、骨修复材料等生物活性材料无菌控制

体外诊断试剂：校准品、质控品等液态诊断产品的无菌检测

药品原辅料：注射用水、无菌原料药的内毒素控制检测

食品无菌包装：UHT奶、饮料等商业无菌产品包装完整性验证

检测标准

中国药典2020年版四部通则1101无菌检查法

GB/T 19973.1-2015 医疗器械灭菌微生物学方法

ISO 11737-1:2018 医疗器械灭菌微生物学方法

USP<71> Sterility Tests 美国药典无菌检测标准

EP 2.6.1 Sterility 欧洲药典无菌检测规范

GB 15980-1995 一次性使用医疗用品灭菌标准

ISO 13408-1:2011 无菌加工医疗器械过程要求

YY/T 0681.1-2018 无菌医疗器械包装试验方法

FDA Guidance for Industry Sterile Products 美国FDA无菌指南

GB 4789.26-2013 食品微生物学检验商业无菌检验

检测仪器

隔离操作器：配备HEPA高效过滤系统，维持操作区ISO 5级洁净环境

全自动微生物检测系统：集过滤、培养、判读功能，检测通量200样本/批次

脉动真空灭菌柜：温度控制范围105-135℃，F0值实时监测精度±0.5

激光尘埃粒子计数器：0.5μm粒子检测灵敏度，流量28.3L/min符合ISO标准

浮游菌采样器：撞击式采样原理，采样流量100L/min，捕获效率≥95%

薄膜过滤装置：多联式过滤支架，同时处理6个样品，真空度控制-80kPa

智能培养箱：温度均一性±0.5℃，CO2浓度控制精度±0.1%

生物指示剂培养器：专用64孔位设计，实时监测孢子复苏过程

无菌检验隔离舱：集成手套操作系统，舱内压差维持10-15Pa正压

快速微生物检测仪：采用荧光检测技术，24小时完成无菌结果判定