小鼠细小病毒检测

检测项目

病毒核酸定性检测：采用PCR方法识别病毒特异性基因序列，检测灵敏度为5 copies/μL样本。

病毒核酸定量检测：基于实时荧光定量PCR技术，测量范围10^1~10^8 copies/μL，精度±0.5 log。

抗体IgG检测：使用间接ELISA法筛查血清样本，灵敏度95%，特异性98%，检测限1:100稀释度。

抗体IgM检测：捕获ELISA法检测早期感染，测量范围1:50~1:1600稀释，变异系数小于10%。

病毒分离培养：通过细胞培养系统接种样本，观察CPE效应，培养周期5~7天，阳性率90%以上。

抗原检测：免疫荧光法可视化病毒蛋白，分辨率0.1 μg/mL，适用固定组织切片。

中和抗体检测：血清中和试验测定抗体滴度，终点稀释法范围1:8~1:1024，重复性±1滴度。

病毒载量测定：qPCR标准曲线法计算拷贝数，线性范围10^2~10^9 copies/reaction，R²≥0.99。

免疫组化检测：组织切片中病毒定位，使用特异性抗体染色，检测限0.5 ng/mm²。

血清学筛查：高通量微孔板检测，通量96样本/批次，假阳性率低于2%，假阴性率低于3%。

基因组测序：NGS平台分析病毒全基因组，覆盖度99%，测序深度30X。

环境样本检测：表面拭子PCR分析，回收率85%~95%，检测限10 copies/cm²。

细胞培养物监控：定期ELISA筛查，周期每批次检测，阈值OD值>0.2为阳性。

生物制品污染检测：qPCR定量残留病毒，灵敏度1 IU/mL，适用于疫苗原料。

交叉反应评估：特异性引物设计验证，非靶标干扰率低于5%。

检测范围

实验小鼠血清：采集自健康或感染小鼠，用于抗体筛查和病毒载量分析。

小鼠组织样本：包括肝脏、脾脏等器官，通过核酸提取进行病毒定位检测。

细胞培养物：如胚胎成纤维细胞系，监控病毒污染和增殖动态。

生物制品原料：疫苗、抗体等生产材料，检测病毒残留以确保安全性。

实验动物饲料：筛查潜在污染源，防止通过摄入途径传播病毒。

环境拭子样本：笼具、设备表面采集，评估实验室交叉污染风险。

疫苗产品：成品质量检测，验证病毒灭活效果和无菌性。

诊断试剂盒：开发验证阶段样本，确保试剂特异性和灵敏度。

转基因小鼠模型：特定品系组织分析，研究病毒宿主互作机制。

实验室设备表面：工作台、离心机等采样，定期生物安全监测。

动物垫料：废弃物处理前检测，控制环境传播链。

细胞培养基：原材料筛查，防止培养过程污染。

血液制品：血清或血浆样本，用于输血安全评估。

冷冻保存样本：长期存储组织或血清，复苏后检测稳定性。

水源样本：饮水系统监控，检测潜在水源污染。

检测标准

ISO 17025:2017：实验室通用能力要求，涵盖检测过程质量控制。

GB/T 14926.19-2001：中国实验动物病毒检测规范，针对啮齿类病原体筛查。

ASTM F2148-01：美国实验动物病毒学检测标准，包括血清学方法。

ISO 15189:2012：医学实验室标准，适用于诊断样本检测流程。

GB/T 16886.7-2015：医疗器械生物学评价，参考病毒污染检测。

EP 2.6.16：欧洲药典病毒检测专论，指导生物制品验证。

ISO/IEC 17043:2010：能力验证标准，确保检测结果比对一致性。

GB 19489-2008：实验室生物安全通用要求，涉及病毒处理规范。

WHO TRS 1011：世界卫生组织病毒检测技术报告，提供全球指南。

ISO 11737-1:2018：灭菌过程验证，关联病毒灭活效果评估。

GB/T 34796-2017：核酸定量检测方法标准，规定qPCR参数。

ISO 10993-18:2020：医疗器械材料生物负载检测，适用病毒筛查。

GB 4789.30-2016：食品微生物检验，扩展至动物源性样本。

OECD 471：经济合作组织指南，涉及遗传毒性相关病毒检测。

ISO 21571:2005：分子生物学检测通用要求，覆盖PCR流程。

检测仪器

实时荧光定量PCR仪：用于病毒核酸扩增和定量检测，提供高灵敏度动态监测，支持多通道荧光分析。

酶标仪：执行ELISA抗体检测，自动读取吸光度值，实现高通量血清筛查。

生物安全柜：提供无菌操作环境，防止样本交叉污染，保障检测人员安全。

离心机：分离血清或浓缩病毒颗粒，转速范围1000~15000 rpm，确保样本纯度。

显微镜：观察细胞培养物病变效应，配备荧光模块，用于免疫组化分析。

核酸提取仪：自动化纯化病毒RNA/DNA，通量48样本/批，提取效率大于95%。

层流净化台：样本预处理区域维护，减少环境微粒干扰检测结果。

电泳系统：验证PCR产物特异性，凝胶成像分辨率达0.1 ng DNA。

冷冻离心机：低温处理敏感样本，温度控制-20°C，保持病毒稳定性。

恒温培养箱：病毒分离培养环境，温度精度±0.5°C，湿度控制90%。