土壤中微生物的测定检测

检测项目

细菌总量测定：采用平板计数法检测土壤可培养细菌数量，检测范围10³~10⁸ CFU/g

真菌生物量检测：通过麦角固醇提取-高效液相色谱法，灵敏度达0.01μg/g

放线菌分离计数：使用改良高氏1号培养基，培养温度28±1℃，检测限≥100 CFU/g

氨氧化细菌定量：基于amoA基因的qPCR检测，扩增效率90%~110%

磷酸酶活性测定：荧光底物MUF-P法，37℃培养1h，单位nmol/g/h

脱氢酶活性检测：TTC还原法，反应时间24h，结果以TPF μg/g表示

微生物碳量测定：氯仿熏蒸提取法，提取液0.5M K₂SO₄，检测精度±5%

固氮菌分离鉴定：无氮培养基培养，菌落形态与16S rRNA测序结合

纤维素分解菌计数：羧甲基纤维素钠培养基，透明圈法判定

微生物多样性分析：Illumina MiSeq平台16S/ITS高通量测序，序列量≥50,000 reads/样本

微生物呼吸强度：密闭培养-气相色谱法，CO₂释放量mg/kg·d

硝化强度检测：氯酸盐抑制法，铵态氮转化率测定

检测范围

农田耕作土壤：监测化肥农药使用对根际微生物群落的影响

矿区修复土壤：评估重金属污染区域的微生物修复潜力

森林生态系统：分析不同林型土壤微生物碳循环功能

湿地沉积物：检测甲烷菌与反硝化菌的垂直分布特征

城市绿化带：研究城市化对土壤微生物多样性的影响

有机种植基地：验证有机管理对微生物肥力的提升效果

垃圾填埋场覆土：监测渗滤液污染区的微生物活性恢复

盐碱化改良区：分析微生物群落结构演替规律

冻土生态系统：检测低温环境下微生物代谢适应性

设施农业土壤：评估连作障碍与微生物失衡的关联性

水源保护区：监控土壤病原微生物迁移风险

荒漠化区域：研究固沙植被根瘤菌的定殖规律

检测标准

GB/T 32723-2016 土壤微生物生物量的测定 熏蒸提取法

ISO 14240-1:1997 土壤质量 微生物生物量测定 基质诱导呼吸法

HJ 717-2014 土壤质量 全氮的测定 凯氏法（微生物氮转化相关）

ASTM D5988-2018 好氧堆肥中微生物活性标准测试方法

GB/T 36197-2018 土壤质量 土壤酶活性的测定

ISO 16072:2011 土壤微生物呼吸测定实验室方法

LY/T 1237-2020 森林土壤磷酸酶活性测定

ISO 17601:2016 基于DNA的土壤微生物群落分析

NY/T 1121.16-2020 土壤微生物数量测定 稀释平板法

HJ 615-2011 土壤中有机碳的测定（微生物碳关联指标）

检测仪器

全自动微生物定量分析系统：集成分光光度检测与图像识别，实现菌落智能计数

实时荧光定量PCR仪：搭载96孔快速反应模块，用于功能基因绝对定量分析

高通量测序平台：配备双端300bp测序芯片，完成微生物群落结构解析

全自动酶标仪：集成温控与震荡功能，支持多波长微生物酶活性检测

冷冻干燥机：配备真空控制系统，保持微生物样品活性成分稳定

厌氧培养工作站：三气混合控制系统，满足严格厌氧菌分离需求

显微操作系统：配备差分干涉镜头，实现单细胞微生物分离操作

微生物呼吸计量仪：高精度CO₂传感器，检测限0.1ppm

生物分子相互作用仪：表面等离子共振技术研究微生物-土壤吸附机制

全自动核酸提取仪：磁珠法纯化流程，通量达96样本/次