病毒小鼠模型检测

检测项目

病毒滴度定量：采用空斑形成试验或TCID₅₀法，检测范围10¹-10⁹ PFU/mL，灵敏度±0.5 log₁₀

组织病毒载量检测：qPCR法测定器官样本病毒RNA/DNA，定量限100 copies/g，扩增效率90%-110%

血清中和抗体效价：基于微量中和试验，测定50%抑制终点(PRNT₅₀)，稀释梯度1:10-1:5120

细胞免疫应答分析：流式细胞术检测CD4+/CD8+T细胞亚群，分辨率±2%，设门一致性≥95%

炎性因子谱分析：Luminex多因子检测32种细胞因子，检测范围0.2-5000 pg/mL，CV＜10%

病理组织学评分：H&E染色切片盲法评估，按0-4分制量化肺/肝损伤

病毒抗原定位：免疫组化法检测组织病毒蛋白分布，灵敏度阈值1:800稀释度

血常规动态监测：全自动血液分析仪检测WBC/PLT数值，精度±3%

脏器系数测定：脑/肺/脾质量体重比计算，电子天平精度0.1 mg

生存曲线分析：Kaplan-Meier法统计中位生存期，置信区间95%

病毒序列变异追踪：NGS深度测序覆盖度≥100X，突变检出限5%

免疫组库分析：TCR/BCR高通量测序，独特序列识别率＞10⁶

检测范围

流感病毒小鼠模型：甲型H1N1/H3N2感染模型，用于抗病毒药物评价

新冠病毒ACE2转基因模型：hACE2受体表达验证，适用疫苗免疫原性研究

乙型肝炎病毒转基因模型：HBV基因组整合检测，应用于抗病毒疗法开发

HIV人源化小鼠模型：重建人类免疫系统，用于抗体中和效力测试

寨卡病毒垂直传播模型：胚胎神经发育影响评估

登革热病毒致病模型：抗体依赖性增强效应(ADE)机制研究

呼吸道合胞病毒模型：早产儿重症感染机制模拟

轮状病毒腹泻模型：肠道病理损伤分级标准

疱疹病毒潜伏感染模型：神经元病毒再激活研究

狂犬病病毒神经侵袭模型：血脑屏障穿透性测试

埃博拉病毒致死模型：凝血功能障碍监测

诺如病毒人源化模型：肠道类器官共培养系统

检测标准

ISO 10993-22:2017医疗器械生物学评价第22部分：纳米材料毒性试验

GB/T 35823-2018实验动物动物实验通用要求

AAALAC国际认证动物福利准则

WHO TRS 1011病毒疫苗临床前评价指南

FDA Guidance for Industry: Preclinical Assessment of Investigational Cellular and Gene Therapy Products

ISO 15189:2012医学实验室质量能力要求

GB 14922.2-2011实验动物微生物等级监测

PHS Policy on Humane Care and Use of Laboratory Animals

ICH S6(R1)生物技术药物临床前安全性评价

ASTM F2721-09病毒载体滴度检测标准指南

检测仪器

实时荧光定量PCR仪：ABI QuantStudio 7 Pro，完成病毒载量绝对定量，温度均一性±0.25℃

高通量流式细胞仪：BD Symphony A5，实现28色免疫表型分析，检测速度30,000细胞/秒

全自动病理切片扫描系统：Leica Aperio AT2，40倍高清数字化切片，分辨率0.25μm/像素

多重液相芯片分析平台：Millipore Luminex 200，同步检测37种细胞因子，动态范围3.5 logs

活体成像系统：PerkinElmer IVIS Spectrum，实时监测病毒生物发光分布，灵敏度＜1 pM荧光素

超速离心机：Beckman Optima XPN，病毒纯化梯度分离，最大RCF 1,050,000×g

显微操作注射系统：Eppendorf TransferMan 4m，胚胎干细胞精准移植，定位精度0.5μm