植物抗病性定性检测试验

检测项目

病原体接种：采用喷雾法或注射法进行人工接种，孢子浓度10⁵~10⁷ CFU/mL，接种量0.1mL/株

病症观察：记录病害症状发展过程，分级标准0~5级，0无病症至5全株死亡

抗性评分系统：基于病症级别计算抗性指数，评分范围0~100%，阈值80%以上为高抗性

病害发生率测定：统计感染植株比例，采样点不少于10株，误差±2%

潜伏期测量：病原体接种后至病症出现的时间间隔，记录单位天，精度±0.5天

组织病理学分析：显微镜下观察叶片或根部病变，放大倍数100~400倍

分子检测：PCR扩增病原体DNA，引物浓度0.5μM，循环次数35次，检出限1pg/μL

血清学检测：ELISA法测量抗体水平，波长450nm，吸光度阈值0.1以上

生化指标测定：过氧化物酶活性检测，单位U/mg蛋白，反应时间30分钟

生长抑制评估：植株高度测量，精度±0.1cm，对照组比较计算抑制率

光合参数分析：叶绿素含量测定，提取溶剂比率1:9丙酮:水，分光光度计读数663nm

根系病变评分：根长和腐烂程度评估，分级0~4级，0健康至4完全腐烂

病原体再分离：感染组织培养后计数菌落，培养基pH 6.5，温度25±1°C

细胞膜透性检测：电导率测量法，单位μS/cm，叶片浸泡时间2小时

抗氧化酶测定：超氧化物歧化酶活性分析，反应体系体积1mL，灵敏度0.01U

检测范围

谷物作物：小麦、水稻、玉米的抗病品种筛选，评估镰刀菌或稻瘟病抗性

蔬菜作物：番茄、土豆、辣椒的晚疫病或青枯病抗性检测

果树作物：苹果、柑橘、葡萄的炭疽病或溃疡病抗性评估

经济作物：棉花、油菜的枯萎病或菌核病抗性筛选

转基因植物：导入抗病基因的品系功能验证，如Bt毒素抗虫性相关

种子处理产品：包衣种子抗病效果测试，涵盖萌芽期病害防护

生物制剂：拮抗微生物制剂抗病效能评估，如芽孢杆菌施用效果

化学农药：杀菌剂处理后的植物抗性维持能力检测

育种材料：亲本杂交后代抗病性遗传分析，用于育种程序优化

园林植物：观赏花卉或草坪草的白粉病或锈病抗性测试

药用植物：人参、黄芪的根腐病抗性评估

林木作物：松树、橡树的松材线虫病抗性筛选

食用菌栽培：蘑菇褐腐病抗性检测

有机农业产品：无农药条件下抗病性能验证

植物组织培养物：离体培养材料的病原体响应分析

检测标准

ISO 11269-1:1993 土壤质量-植物生长测试-植物病害评估方法

ISO 22030:2005 植物保护产品-抗病性试验指南

ASTM D6276-19 植物病理学试验标准规范

GB/T 28068-2011 农作物抗病性鉴定技术规范

GB/T 32367-2015 植物病害田间调查方法

GB/T 23348-2009 转基因植物环境安全检测-抗病性评价

GB/T 3543.5-1995 农作物种子检验规程-病害检验

ISO 16198:2015 植物生物技术-转基因植物病害风险评估

ASTM E2097-00 温室植物病害监测标准

GB/T 28975-2012 植物病原真菌接种技术规范

ISO 16212:2017 植物病害分子检测通用要求

GB/T 19495.7-2004 转基因植物及其产品检测-抗病性部分

ASTM D8342-20 植物抗病性生化指标分析方法

GB/T 32446-2015 植物病害血清学检测方法

检测仪器

光学显微镜：放大病原体结构和细胞病变，倍数范围40~1000倍，用于组织病理学观察

PCR仪：扩增特定病原体DNA片段，温度控制精度±0.1°C，实现分子检测功能

ELISA阅读器：定量测量抗体或抗原水平，波长范围405~650nm，支持血清学检测

温湿度控制培养箱：模拟感染环境条件，温度范围5~40°C，湿度调节±5%，用于潜伏期实验

分光光度计：测定叶绿素或酶活性吸光度，精度±0.001Abs，应用于生化指标分析

自动接种设备：精确控制病原体接种量和位置，流速精度±1μL，确保接种一致性

病害评估软件：数字化处理病害图像，评分算法基于AI，用于抗性评分系统

电导仪：测量细胞膜透性变化，量程0~1000μS/cm，分辨率0.1μS/cm

离心机：分离组织样本提取液，转速范围0~15000rpm，用于分子或生化检测预处理

光照培养架：调节植物生长光周期，光强0~1000μmol/m²/s，模拟自然条件