抗病酶活性分析检测

检测项目

过氧化物酶(POD)活性：测定愈创木酚氧化速率，检测范围0.01-200 U/mg·min，灵敏度0.5U

苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性：基于肉桂酸生成量分析，线性范围0.05-50 μmol/L，检测限0.02μmol

几丁质酶活力：采用还原糖比色法，测量精度±3%，量程0.1-150 U/mL

β-1,3-葡聚糖酶活性：基于葡萄糖释放量，分辨率0.01U，温度控制37±0.1℃

超氧化物歧化酶(SOD)活性：氮蓝四唑光还原抑制率法，精度±2%，波长560nm

多酚氧化酶(PPO)动力学：邻苯二酚底物体系，Km值检测0.001-10mM，Vmax误差≤5%

过氧化氢酶(CAT)比活力：紫外分光法检测H₂O₂分解，线性范围0.1-100 mM/min

蛋白酶抑制因子活性：胰蛋白酶抑制率法，计量精度0.1μg，重复性RSD＜3%

脂氧合酶(LOX)活性检测：亚油酸氧化法，吸光度234nm，温控25±0.2℃

抗坏血酸过氧化物酶(APX)：抗坏血酸氧化率测量，波长290nm，反应时间控制±1s

谷胱甘肽还原酶(GR)活性：NADPH氧化动力学，检测限0.02nmol/min，缓冲体系pH7.8

植保素合成关键酶检测：包括查尔酮异构酶等，HPLC联用，保留时间偏差≤0.1min

检测范围

转基因作物抗性评估：导入外源抗病基因的酶活性表达验证

生物农药制剂：微生物源酶制剂活性稳定性分析

植物诱导抗病剂：水杨酸/茉莉酸甲酯处理后的防御酶激活监测

果蔬采后病理研究：贮藏期抗病酶活性衰减动力学分析

林木抗病育种：松材线虫胁迫下POD/PAL活性响应曲线

药用植物抗逆性：道地药材在病原侵染时的酶防御机制

作物病害预警系统：基于酶活性阈值的早期侵染诊断

微生物生防制剂：木霉菌几丁质酶活性效价测定

抗病种质资源筛选：种质库材料酶活性高通量分型

海洋生物抗病活性物质：海藻多酚氧化酶抑制特性研究

食品保鲜涂层材料：壳聚糖酶活性缓释效能验证

生物膜抗污性能：微生物膜内SOD活性与抗逆相关性

检测标准

ISO 21479:2019 植物生理-过氧化物酶活性分光光度测定法

GB/T 35809-2018 植物酶活性检测通则

AOAC 984.26 食品β-葡聚糖酶活性测定规范

ASTM E2694 超氧化物歧化酶活性测试标准流程

GB/T 38503-2020 几丁质酶活性检测紫外分光法

ISO 20633:2017 生物制剂中蛋白酶抑制因子活性测定

EP 2.5.32 欧洲药典植保素相关酶活性试验

GB/T 40275-2021 脂氧合酶活性检测技术规范

JIS K 3703 日本工业标准植酸酶活性试验方法

ISO 30024 动物饲料中植酸酶活性测定

检测仪器

多功能酶标仪：96孔板高通量检测，波长范围200-1000nm，温控精度≤±0.1℃，支持动力学分析

紫外可见分光光度计：双光束系统，光谱带宽0.1nm，用于比色法酶活测定

高效液相色谱仪：C18反相色谱柱，二极管阵列检测器，定量分析酶反应产物

恒温振荡反应仪：反应体系温控±0.2℃，转速50-300rpm可调，保障酶解充分性

微量热泳动仪：检测酶-底物结合常数，灵敏度0.1nM，用于抑制剂效价评估

冷冻高速离心机：最大转速20000rpm，温控-10~40℃，用于酶粗提液制备

自动生化分析仪：支持连续监测法，最小加样量2μL，检测通量400样/小时

荧光偏振仪：检测酶催化反应实时偏振变化，时间分辨率10ms