植物抗病性成分检测分析

检测项目

总酚含量测定：采用Folin-Ciocalteu法，检测范围0.02-2.0 mg/g，精度±0.5μg/mL

类黄酮定量分析：UV-Vis分光光度法，检测波长510nm，线性范围0.1-100μg/mL

病程相关蛋白检测：ELISA法测定β-1,3-葡聚糖酶等，灵敏度0.1ng/mL，孵育温度37±0.5℃

植保素含量分析：HPLC-MS测定辣椒素、芸苔素等，保留时间偏差＜0.2min，RSD≤2%

活性氧代谢检测：NBT还原法测定超氧阴离子，反应时间30min，温度25±0.5℃

苯丙氨酸解氨酶活性：紫外分光法，酶活单位定义为290nm吸光度变化0.01/min

木质素沉积量测定：乙酰溴法，样品处理温度70℃，检测波长280nm

防御酶谱分析：POD/SOD/CAT联合检测，pH7.0磷酸缓冲液，孵育时间15min

水杨酸信号分子：UPLC-ESI-MS/MS检测，离子对m/z 137/93，碰撞能量-25eV

茉莉酸类物质：GC-MS定量分析，甲酯化衍生，色谱柱DB-5MS(30m×0.25mm)

植物抗毒素筛查：RP-HPLC指纹图谱，C18色谱柱，流动相乙腈-0.1%甲酸水

几丁质酶活性：荧光底物法，激发/发射波长380/460nm，酶单位定义μmol/min/mg

检测范围

粮食作物抗性材料：水稻白叶枯病抗性品系、小麦赤霉病突变体等种质资源评价

经济作物防御成分：茶叶茶多酚抗病组分、咖啡绿原酸积累规律等次生代谢研究

药用植物活性物质：药用甘草黄酮类、紫锥菊烷酰胺等免疫增强成分分析

转基因抗病植株：转Bt基因棉花、病毒外壳蛋白表达烟草等分子特征验证

林木抗逆性研究：松树树脂酸抗虫成分、杨树缩合单宁等防御物质监测

园艺作物抗病种苗：番茄抗青枯病嫁接苗、葡萄白粉病耐受品种筛选

生态修复植物：重金属胁迫下芦苇苯丙烷代谢物、湿地植物防御酶响应

组培突变体库：离体筛选的抗枯萎病香蕉、抗晚疫病马铃薯组培苗鉴定

植物源农药制剂：苦参碱乳油、印楝素悬浮剂等生物农药活性成分质控

病原互作体系：稻瘟病菌侵染前后水稻植保素动态、疫霉激发子诱导实验

采后保鲜处理：柑橘青霉病抗性相关柠檬苦素、采后苯丙素代谢通路解析

有机栽培作物：生物诱导剂处理的草莓防御物质、有机茶园儿茶素积累监测

检测标准

ISO 20776-1:2019 植物病害抗性实验室评价通则

GB/T 35809-2018 植物抗病性鉴定技术规范

ISO 21427-2:2006 植物防御酶活性测定方法

GB/T 38086-2019 植物源农药中苦参碱检测方法

AOAC 999.04 植物酚类化合物测定标准程序

GB/T 38163-2019 植物源产品中黄酮醇苷检测

ASTM D7342-07 植物抗毒素分离纯化指南

EP 10.0 2.8.22 药用植物水杨酸含量测定

GB/T 37907-2019 转基因植物外源蛋白检测

ISO 14502-1:2005 茶叶儿茶素类检测方法

USP-NF <561> 植物活性成分色谱分析通则

GB/T 39914-2021 植物类黄酮检测 液相色谱法

检测仪器

三重四极杆液质联用仪：配备ESI源，实现防御激素纳克级定量，质量精度0.01Da

全自动酶标分析系统：96孔板高通量检测，支持POD/PAL等酶动力学分析，温控精度±0.1℃

激光共聚焦显微平台：配置荧光探针，原位观测H₂O₂爆发及胼胝质沉积过程，分辨率0.1μm

制备型逆流色谱仪：无载体分离植保素，转速0-1000rpm，回收率≥95%

高通量植物表型仪：红外成像监测病斑扩展，叶温检测精度0.5℃，叶面积扫描速度5ms/cm²

超高效合相色谱系统：CO₂超临界流体分离非极性抗病成分，背压范围100-6000psi

圆二色光谱仪：测定病程相关蛋白二级结构，波长范围175-250nm，温控精度0.05℃

实时荧光定量PCR仪：抗病基因表达分析，具备熔解曲线功能，温度均一性±0.2℃

基质辅助激光解吸飞行时间质谱：植物抗病蛋白指纹图谱采集，质量范围1-500kDa

自动固相萃取工作站：抗性成分前处理，支持8通道并行操作，流速控制0.01-10mL/min