抗病次生代谢通路分析

检测项目

酚类化合物含量测定：总酚检测范围0-100 mg/g，采用福林酚法，精度±1 mg/g。

类黄酮定量分析：类黄酮浓度检测范围0-50 mg/g，使用HPLC-DAD技术，检出限0.1 mg/g。

萜类化合物分析：单萜和倍半萜含量测定，GC-MS检测范围0-200 μg/g，精度±2 μg/g。

苯丙烷类代谢物检测：木质素前体如香豆素测定，HPLC分离，检测范围0-80 mg/g。

酶活性检测：苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性测定，单位U/mg蛋白，动力学参数Vmax计算。

过氧化物酶活性分析：底物氧化速率检测，灵敏度0.01 U/min，温度控制25-40°C。

基因表达分析：抗病相关基因如PR蛋白基因表达量测定，RT-qPCR检测Ct值范围15-35。

代谢组学全谱分析：次生代谢物鉴定，LC-MS检测质量范围50-1000 m/z，分辨率>10000。

抗氧化能力评估：DPPH自由基清除率测定，IC50值计算范围0-100 μM。

病原菌抑制实验：最小抑制浓度(MIC)测定，菌株抑制率检测范围0-100%.

信号分子检测：水杨酸含量分析，HPLC-UV检测范围0-20 μg/mL，精度±0.5 μg/mL。

通路调控因子分析：转录因子结合活性测定，EMSA检测结合常数Kd值。

次级代谢物生物合成速率：同位素标记法测定，13C追踪速率范围0-50 μmol/h。

代谢物稳定性测试：热稳定性分析，温度梯度40-80°C，半衰期计算。

检测范围

谷物作物：小麦叶片和水稻根系抗病响应代谢物分析，涉及镰刀菌病害。

蔬菜作物：番茄果实和黄瓜叶片次生代谢通路研究，针对疫病防控。

果树类：苹果树皮和梨树枝抗病代谢检测，用于火疫病评估。

经济作物：棉花纤维和烟草叶片次生代谢分析，针对黄萎病研究。

药用植物：人参根部和黄芪全草抗病通路检测，涉及根腐病响应。

微生物发酵产物：细菌发酵液和真菌菌丝抗病代谢物筛选，用于生物防治。

转基因植物材料：抗病基因工程水稻和小麦组织代谢变化评估。

植物组织培养：愈伤组织抗病诱导代谢分析，涉及细胞悬浮培养。

环境胁迫下植物：干旱或盐胁迫玉米和大豆次生代谢响应检测。

生物农药开发：抗病次生代谢物候选物筛选，如植物提取物评估。

种子处理材料：经杀菌剂处理的小麦和大麦种子代谢物变化分析。

森林树木：松树和橡树树皮抗病代谢研究，针对松材线虫病。

水生植物：水稻田藻类抗病通路检测，用于藻华防控。

园艺花卉：玫瑰和菊花花瓣次生代谢分析，涉及灰霉病响应。

检测标准

依据ISO 11052:2006测定谷物中酚类化合物含量。

GB/T 5009.124-2003规范食品中黄酮类化合物检测方法。

ASTM E1840用于植物提取物抗氧化活性标准测试。

ISO 5725规定测试方法的精度和准确度要求。

GB/T 22244-2008规范植物组织中酶活性测定程序。

ISO 21527涉及真菌毒素检测相关次生代谢分析。

GB/T 30987-2014规定植物基因表达分析技术标准。

ISO 16649微生物抑制实验标准应用于次生代谢检测。

GB/T 19495转基因植物检测标准涵盖代谢通路分析。

ASTM D6866同位素标记法测定生物合成速率标准。

检测仪器

高效液相色谱仪(HPLC)：用于分离和定量酚类、类黄酮等次生代谢物，检测限达0.01 μg/mL。

气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)：分析挥发性萜类化合物，质量范围覆盖50-650 Da。

实时荧光定量PCR仪：检测抗病相关基因表达水平，灵敏度可测单拷贝基因。

紫外-可见分光光度计：测定酶活性或总酚含量，波长范围190-1100 nm。

高分辨率质谱仪(LC-MS)：用于代谢组学全谱分析，分辨率>30000。

酶标仪：高通量检测抗氧化能力或酶活性，支持96孔板格式。

恒温培养箱：控制病原菌抑制实验温度，范围20-60°C精度±0.5°C。