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豇豆病毒花叶检疫检测

豇豆病毒花叶检疫检测

检测项目豇豆花叶病毒(CPMV)、黄瓜花叶病毒(CMV)、蚕豆萎蔫病毒(BBWV)、菜豆普通花叶病毒(BCMV)、南方菜豆花叶病毒(SBMV)、烟草环斑病毒(TRSV)、番茄斑萎病毒(TSWV)、马铃薯Y病毒(PVY)、苜蓿花叶病毒(AMV)、豌豆早褐病毒(PEBV)、甜菜曲顶病毒(BCTV)、南瓜花叶病毒(SqMV)、辣椒轻斑驳病毒(PMMoV)、番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)、李痘病毒(PPV)、水稻条纹病毒(RSV)、小麦线条花叶病毒(WSMV)、玉米褪绿斑驳病毒(MCMV)、柑橘速衰病毒(CTV).

检测项目

豇豆花叶病毒(CPMV)、黄瓜花叶病毒(CMV)、蚕豆萎蔫病毒(BBWV)、菜豆普通花叶病毒(BCMV)、南方菜豆花叶病毒(SBMV)、烟草环斑病毒(TRSV)、番茄斑萎病毒(TSWV)、马铃薯Y病毒(PVY)、苜蓿花叶病毒(AMV)、豌豆早褐病毒(PEBV)、甜菜曲顶病毒(BCTV)、南瓜花叶病毒(SqMV)、辣椒轻斑驳病毒(PMMoV)、番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)、李痘病毒(PPV)、水稻条纹病毒(RSV)、小麦线条花叶病毒(WSMV)、玉米褪绿斑驳病毒(MCMV)、柑橘速衰病毒(CTV)、苹果茎沟病毒(ASGV)、葡萄卷叶伴随病毒(GLRaV)、香蕉束顶病毒(BBTV)、木薯褐条病毒(CBSV)、甘薯羽状斑驳病毒(SPFMV)、西葫芦黄化花叶病毒(ZYMV)、芜菁花叶病毒(TuMV)、洋葱黄矮病毒(OYDV)、大麦条纹花叶病毒(BSMV)、水稻黑条矮缩病毒(RBSDV)、番茄丛矮病毒(TBSV)、马铃薯X病毒(PVX)、烟草花叶病毒(TMV)

检测范围

豇豆种子表皮组织、子叶胚乳样本、成熟植株叶片维管束切片、茎秆韧皮部渗出液、根系分泌物浓缩物、田间土壤浸出液、灌溉水沉淀物、农具表面拭子样本、传毒昆虫(蚜虫/粉虱/蓟马)消化道内容物、育苗基质提取液、嫁接刀具残留物、包装材料表面附着物、仓储环境空气微粒样本、加工制品冻干粉末、有机肥发酵产物、花粉孢子悬浮液、病株汁液离心上清液、温室覆盖膜冷凝水样本、农机润滑油残留物、实验室培养皿洗脱液、运输车辆厢体刮取物、仓储害虫排泄物标本、雨水径流沉积物样本、堆肥腐熟度测试样品、邻近作物交叉污染样本

检测方法

双抗体夹心ELISA法:利用抗原-抗体特异性结合原理定量测定病毒外壳蛋白浓度;实时荧光定量PCR:基于TaqMan探针技术实现靶标核酸序列扩增与实时监测;电子显微镜负染法:通过磷钨酸染色观察病毒粒子形态特征;核酸斑点杂交:采用地高辛标记探针进行膜上核酸杂交分析;免疫胶体金试纸条:纳米金标记抗体实现田间快速初筛;超速离心富集法:差速离心结合蔗糖密度梯度纯化病毒粒子;dsRNA提取技术:利用纤维素柱层析分离双链RNA分子;高通量测序:Illumina平台进行小RNA深度测序与生物信息学分析;生物测定法:通过指示植物接种观察系统侵染症状;冷冻切片免疫荧光:低温切片保持抗原活性并进行荧光抗体定位

检测标准

GB/T36809-2018植物检疫性有害生物鉴定规程SN/T2125-2018进出境豆类种子检疫规程ISO17075:2017植物病害诊断分子检测通用要求EPPOPM7/98(2)豇豆花叶病毒诊断协议GB/T35334-2017植物病原体实时荧光PCR检测通则NY/T401-2000蔬菜种子产地检疫规程ISPM27限定性有害生物诊断规程GB/T36783-2018植物检疫样品保存技术规范SN/T2963-2011植物病原免疫学检测质量控制规范ISO16140-3:2021微生物学方法验证国际标准

检测仪器

全自动酶标分析系统:配备405nm/450nm双波长滤光片实现96孔板高通量ELISA读数;实时荧光定量PCR仪:配置FAM/HEX/VIC/ROX多通道光学系统满足多重检测需求;超薄切片机:配备金刚石刀片制备80-100nm电镜观察样品;冷冻离心浓缩仪:采用真空离心技术实现大体积样本中病毒的低温富集;核酸蛋白测定仪:紫外分光光度法快速测定RNA/DNA纯度及浓度;全自动电泳系统:预制胶芯片技术完成核酸片段分离与成像分析;超低温生物显微镜:-20℃载物台环境保持样品活性进行动态观察;激光共聚焦显微镜:Z轴层扫功能实现三维免疫荧光定位分析;纳米孔测序仪:OxfordNanopore技术进行长片段实时测序;全自动液体处理工作站:整合移液与温控模块实现标准化加样流程