蜂毒溶血肽含量检测

检测项目

纯度测定、分子量分析、氨基酸序列验证、溶血活性测试、蛋白质含量测定、多肽图谱分析、内毒素检测、微生物限度检查、重金属残留量测定、有机溶剂残留量测定、过敏原筛查、热原试验、pH值测定、电导率测试、紫外吸收光谱分析、圆二色光谱分析、荧光强度测定、酶联免疫吸附试验（ELISA）、细胞毒性试验、致敏性评估、稳定性测试、氧化产物分析、二硫键定位分析、N端序列测定、C端序列测定、游离氨基含量测定、游离羧基含量测定、聚合体含量测定、降解产物分析、生物效价测定

检测范围

蜜蜂毒液原液、蜂毒冻干粉制剂、蜂毒注射液成品、蜂毒透皮贴剂基质液、蜂毒眼用凝胶半成品、蜂毒口腔喷雾剂原料液、蜂毒纳米脂质体悬浊液、蜂毒微针贴片浸提液、蜂毒乳膏基质混合物、蜂毒医用敷料浸出液、蜂毒生物传感器校准液、蜂毒疫苗佐剂中间体溶液剂型样品

检测方法

高效液相色谱法（HPLC）：采用C18反相色谱柱进行分离，通过梯度洗脱程序实现不同分子量多肽的分离定量。

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOFMS）：用于精确测定分子量及确认多肽序列完整性。

圆二色光谱法：通过特征吸收峰分析α-螺旋结构含量以评估生物活性保留率。

动态光散射技术（DLS）：测量纳米级制剂中微粒粒径分布及聚集状态。

微量BCA蛋白定量法：基于双缩脲反应原理进行总蛋白含量精确测定。

体外溶血试验：采用兔红细胞悬液模拟生理环境评估溶血活性强度。

三重四极杆液质联用（LC-MS/MS）：实现痕量降解产物的高灵敏度定性定量分析。

毛细管电泳法（CE）：通过电场迁移率差异分离电荷变异体及异构体。

检测标准

GB/T35832-2018蜂产品中蜂毒肽含量的测定高效液相色谱法
ISO20776-1:2019体外溶血试验标准化操作规程
USP<1058>生物制品分析方法验证指导原则
EP2.6.14多肽类药物纯度测定规范
ChP2020四部生物制品溶血检查法
AOAC994.12食品接触材料中重金属迁移量测定方法
ICHQ6B生物技术产品质量特性分析方法建立指南
ASTME2694-21动态光散射法测量纳米颗粒粒径标准规程
JPXVII注射剂热原试验家兔法实施细则
FDAGuidanceforIndustry:BioanalyticalMethodValidation

检测仪器

超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱联用系统（UHPLC-QTOF）：实现复杂基质中目标物的高分辨率分离与结构鉴定。

全自动氨基酸分析仪：通过离子交换色谱法精确测定氨基酸组成比例。

多功能酶标仪：完成ELISA法生物活性测定及细胞毒性MTT比色分析。

纳米粒度电位分析仪：同步测量Zeta电位与粒径分布评估制剂稳定性。

微量热差示扫描量热仪（Micro-DSC）：监测热变性过程以评价多肽构象稳定性。

超灵敏化学发光成像系统：用于Westernblot验证特异性条带显影。

全自动凯氏定氮仪：通过氮含量换算精确测定总蛋白浓度。

电感耦合等离子体质谱仪（ICP-MS）：实现ppb级重金属元素痕量分析。