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蛋白质摩尔消光系数测定

蛋白质摩尔消光系数测定

发布时间:2023-06-30 09:31:49 检测周期:7-10个工作日

蛋白质摩尔消光系数测定有哪些测试方法?中析研究所检测中心作为拥有CMA资质的综合型科研检测单位,能够参考蛋白质摩尔消光系数测定标准规范中的试验方法对完全蛋白、半完全蛋白、不完全蛋白、球状蛋白等蛋白质的摩尔消光系数测定等项目进行检验测试,并出具相关测试报告。...

检测范围

蛋白质摩尔消光系数是衡量蛋白质在特定波长下的吸光能力,常用于蛋白质浓度的测定和定量分析中。蛋白质摩尔消光系数是每摩尔蛋白质对应的吸光度值,通常表示为ε(epsilon)。蛋白质摩尔消光系数可以根据蛋白质的氨基酸组成、波长和溶液条件等因素而变化。

蛋白质摩尔消光系数测定试验检测范围涵盖:

完全蛋白、半完全蛋白、不完全蛋白、球状蛋白、纤维状蛋白、膜蛋白、角蛋白、胶原、伴娘蛋白、肌红蛋白、血红蛋白等。

检测项目

不同蛋白质的摩尔消光系数是不同的,蛋白质的摩尔消光系数受其构象、磷酸盐浓度、溶剂的性质和pH值等因素的影响,因此在测定蛋白质浓度时应注意这些因素的控制,以确保测量结果的准确性。

蛋白质摩尔消光系数的值通常是在特定波长下确定的。常见的波长是280纳米,即UV-Vis光谱中的波长。在该波长下,由于蛋白质中芳香族氨基酸(如酪氨酸和苯丙氨酸)的存在,蛋白质的吸光度较高,可以用来进行浓度的测定。

确定蛋白质摩尔消光系数的常用方法是通过使用紫外可见光谱仪进行测定。以下是测定蛋白质摩尔消光系数的一般步骤:

样品准备:首先需要将纯净的蛋白质溶解在适当的缓冲溶液中。确保溶液中没有杂质或其他吸光物质。

样品浓度测定:使用光滑石英比色皿或紫外可见光滑石英比色皿,将样品溶液转移到皿中,并进行空白校正。使用紫外可见光谱仪测量样品溶液在波长范围内的吸光度。

确定摩尔吸光系数:根据比色皿中的浓度和吸光度值,使用比色皿的路径长度和波长进行计算,确定蛋白质的摩尔吸光系数。公式为:ε = A / (c l),其中ε为摩尔吸光系数,A为吸光度,c为浓度,l为路径长度。

试验周期

:一般7-10个工作日出具报告,可加急。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托。

检测标准

GB/T 38477-2020 基因表达的测定 蛋白印迹法

GB 7300.601-2020 饲料添加剂 第6部分:非蛋白氮 尿素

GB/T 38578-2020 水产源致敏性蛋白快速检测 毛细管电泳法

GB/T 38172-2019 蛋白A亲和层析介质

GB/T 38163-2019 常见过敏蛋白的测定 液相色谱-串联质谱法

GB/T 38086-2019 生物样品中金属硫蛋白含量的测定

GB/T 6432-2018 饲料中粗蛋白的测定 凯氏定氮法

GB 20371-2016 食品安全国家标准 食品加工用植物蛋白

GB 1903.17-2016 食品安全国家标准 食品营养强化剂 乳铁蛋白

GB/T 31578-2015 粮油检验 粮食及制品中粗蛋白测定 杜马斯燃烧法

试验仪器

蛋白质摩尔消光系数的测定通常需要使用紫外可见光谱仪。紫外可见光谱仪是一种常用的实验仪器,用于测量物质在紫外和可见光波段的吸收和透过性。

在具体的蛋白质摩尔消光系数测定实验中,一般需要准备以下仪器设备:

紫外可见光谱仪:用于测量样品在紫外和可见光波段的吸光度。常见的紫外可见光谱仪包括单光束和双光束型,可以根据实验需求选择适合的型号和规格。

显微量注射器:用于精确地取样和移液,以控制实验中的样品量。

量筒或烧瓶:用于稀释样品或溶液,以便在测量时得到适合的浓度范围。

稀释液:用于将样品稀释为合适的浓度,以确保吸光度在适当的范围内。

常规实验室仪器和耗材:如移液器、试管、离心机等。

  

检测流程

检测流程是非常重要的一环,我们遵循严谨的流程来保证检测的准确性和可靠性。流程包括以下几个步骤:

首先,我们确认并指定测试对象进行初步检查,对于需要采样的测试,我们会确认样品寄送或上门采样的具体安排。

接下来,我们制定实验方案并与委托方确认和协商,对实验方案的可行性和有效性进行验证,以确保测试结果的精度和可靠性。

然后,双方签署委托书,明确测试的内容、标准、报告格式等细节,并确认测试费用并按照约定进行支付。在试验测试过程中,我们按照实验方案进行试验测试,记录数据并进行必要的控制和调整,以确保测试过程中数据收集和处理的准确性和规范性。

最后,我们对试验测试过程中获得的数据进行分析和归纳,撰写测试报告并进行审核,出具符合要求的测试报告,并将测试结果及时反馈给委托方。

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