咨询热线: 400-635-0567

细胞质rna提取检测

细胞质rna提取检测

细胞质RNA提取检测是分子生物学关键流程,专业检测聚焦RNA浓度、纯度、完整性等参数,确保样本无降解、无污染。要点包括精确定量、避免RNase污染、评估A260/A280比值及RIN值,满足下游应用如qPCR或测序要求。.

检测项目

RNA浓度检测:测量范围0.1-5000 ng/μl,精度±5%,使用分光光度法定量样本核酸含量。

RNA纯度检测:A260/A280比值1.8-2.0,检测范围0.5-3.0,评估蛋白质或溶剂污染程度。

RNA完整性检测:RIN值范围1-10,通过电泳分析片段分布,判断降解水平。

DNA污染检测:残留DNA阈值<5%,采用DNase处理验证,灵敏度0.01 ng/μl。

RNase活性检测:酶活性单位0-10 U,检测限0.01 U,确保提取过程无降解风险。

pH值检测:样本pH范围6.5-7.5,精度±0.1,控制缓冲条件避免酸解。

导电性检测:离子浓度0-100 mS/cm,精度±1%,评估盐分残留影响反转录效率。

分子量分布检测:片段大小100-10000 bp,分辨率±5 bp,通过凝胶电泳确认完整性。

生物安全性检测:病原体污染筛查,阈值<10 CFU/ml,确保样本无生物危害。

稳定性检测:降解率<5%/月,评估-80°C储存条件下RNA保存期限。

定量PCR兼容性检测:反转录效率>90%,CT值变异系数<5%,验证下游应用适用性。

样本回收率检测:提取效率85-115%,精度±3%,使用内标物校准方法准确性。

检测范围

动物组织样本:包括肝脏、脑等器官,用于基因表达研究或疾病模型分析。

植物细胞样本:如叶片、根系组织,应用于转基因作物检测或胁迫响应研究。

临床样本:血液、唾液等体液,用于传染病诊断或生物标志物筛查。

微生物培养样本:细菌、酵母RNA,支持抗生素耐药性研究或发酵过程监控。

细胞培养物样本:哺乳动物细胞系,用于药物筛选或癌症机制探索。

环境样本:土壤、水中的RNA,检测污染物或微生物群落动态。

食品样本:如肉类、谷物,筛查病原体或转基因成分。

法医样本:混合DNA/RNA材料,应用于身份鉴定或犯罪现场分析。

制药行业样本:药物研发中的细胞模型,评估化合物毒性或疗效。

转基因生物样本:GMO作物组织,用于合规性检测或环境风险评估。

兽医样本:动物体液或组织,支持疫病防控或疫苗开发。

工业发酵样本:微生物发酵液,监控代谢产物或工艺优化。

检测标准

ISO 20395:2019 生物技术-核酸定量方法,规范分光光度法浓度检测。

ASTM E2186-02a RNA完整性标准测试方法,定义电泳评估参数。

GB/T 34796-2017 核酸提取纯化试剂盒通用要求,涵盖纯度与污染控制。

GB/T 37864-2019 生物样本中RNA检测方法,规定临床样本处理流程。

ISO 17025 检测和校准实验室能力通用要求,确保整体检测质量。

ASTM D4196-05 水质中RNA标准测试指南,适用于环境样本分析。

GB/T 30987-2014 植物RNA提取方法,针对植物组织特定要求。

ISO 21571 食品中核酸检测通用原则,指导食品样本预处理。

GB/T 36006-2018 微生物RNA检测规范,用于培养样本质量控制。

ASTM F3172-15 法医RNA分析标准,定义混合样本处理协议。

检测仪器

分光光度计:如NanoDrop系列,测量RNA浓度和A260/A280比值,精度达0.1 ng/μl。

凝胶电泳系统:如Agilent Bioanalyzer,评估RNA完整性及RIN值,分辨率±1 bp。

实时定量PCR仪:如Applied Biosystems 7500,检测RNA表达水平及反转录效率,灵敏度0.1拷贝。

高速离心机:如Eppendorf 5430,用于RNA提取中的细胞裂解和沉淀分离,转速范围100-15000 rpm。

微量移液器:如Gilson Pipetman,精确移取样本和试剂,精度±0.5%确保定量准确。

恒温器:如Thermo Scientific水浴槽,控制反应温度在4-95°C,避免RNA降解。

核酸提取仪:如Qiagen Qiacube,自动化处理样本,提高提取效率和一致性。