ptsd小鼠模型检测

检测项目

恐惧条件反射测试：测量声音/环境关联恐惧记忆强度，采用0.7mA电击强度，延迟制约范式训练5天，冻结行为记录精度±0.1秒

高架十字迷宫测试：评估焦虑样行为，迷宫臂长50cm×宽10cm，光照强度100lux，600秒测试期内记录开臂停留时间占比

强迫游泳测试：检测绝望样行为，圆柱直径20cm×高度40cm，水温25±1℃，累计不动时间测量误差≤3%

糖水偏好实验：量化快感缺失，48小时双瓶选择，蔗糖浓度1%，舔舐次数红外监测分辨率1ms

血清皮质酮检测：HPA轴功能评估，ELISA法检测范围0.2-60ng/ml，采样时间固定ZT3-ZT5

海马BDNF浓度测定：神经元可塑性指标，Western Blot定量检测，样本量≥30μg蛋白/泳道

前额叶c-Fos表达：神经元激活标记，免疫组化染色计数，切片厚度40μm，抗体稀释比1:1000

睡眠结构监测：EEG/EMG联合记录，采样率256Hz，δ波功率谱分析慢波睡眠占比

杏仁核场电位记录：恐惧记忆神经编码，在体多电极阵列，阻抗1-2MΩ，LTP诱导高频刺激100Hz

肠道菌群测序：肠-脑轴机制研究，16S rRNA V3-V4区扩增，测序深度＞50,000reads/样本

血浆炎性因子阵列：IL-6、TNF-α等检测，Luminex多因子平台，检测下限0.1pg/ml

全脑清浊透明化成像：神经环路易构，CLARITY处理14天，共聚焦Z轴层厚1μm

检测范围

单次延长应激模型(SPS)：72小时连续应激暴露，含束缚、强迫游泳等复合刺激

情景恐惧增强模型：听觉惊吓与背景环境双重关联范式

社会挫败应激模型：入侵者范式持续10天，攻击行为视频分析

幼年期应激模型：母婴分离程序，产后第1-14天每日分离3小时

创伤暴露模型：捕食者气味应激，TMT溶液浓度5%连续暴露7天

基因修饰小鼠品系：BDNF-Val66Met点突变、FKBP5敲除等遗传模型

药物诱导模型：育亨宾激发实验，腹腔注射剂量2.1mg/kg

创伤记忆再巩固模型：记忆提取后干预时间窗6小时

性别差异研究模型：雌性小鼠发情周期同步化处理

老年PTSD模型：18月龄小鼠联合慢性温和应激

共生菌移植模型：应激源暴露前粪菌定植干预

光遗传调控模型：AAV-ChR2病毒注射BLA核团

检测标准

行为学测试遵循NIH指南RRID:SCR_003525

恐惧记忆评估采用ISO10993-22神经毒性实验补充条款

动物福利符合AAALAC认证标准

分子检测执行GB/T 35823-2018实验动物检测方法通则

组织处理参照GB/T 39759-2021实验动物病理检查规程

微生物检测依据ISO 17025实验室质量控制规范

基因操作符合GB 14923-2010实验动物遗传质量控制

数据分析执行GB/T 27407-2010实验室质量控制规范

伦理审查参照ARRIVE 2.0指南

统计方法采用GB/T 3358.1-2009统计学术语标准

检测仪器

无轨穿梭箱系统：自动记录冻结反应，红外阵列精度256点/m²，符合IEC 61000-4-2静电防护标准

动物行为视频分析仪：DeepLabCut深度学习框架，轨迹追踪分辨率0.1mm

超高效液相色谱质谱联用仪：皮质酮定量检测，质量精度＜1ppm，流速范围0.001-2ml/min

在体多通道神经电生理系统：同步记录128通道，采样率40kHz，输入噪声＜2μV RMS

激光共聚焦显微镜：神经元三维重构，Z轴步进精度10nm，488/561/640nm三激光通道

全自动酶标分析系统：96孔板高通量检测，吸光度检测范围0-4OD，温控精度±0.1℃

脑立体定位注射仪：定位精度±5μm，注射速度控制0.05-5μl/min

小动物活体成像系统：生物发光检测灵敏度＜1pM，FOV直径10cm

睡眠脑电监测平台：EEG/EMG六导联同步，陷波滤波50Hz工频噪声

高通量测序仪：Illumina NovaSeq 6000，通量＞6Tb/run，Q30≥90%