质谱蛋白组学检测

检测项目

蛋白质定性鉴定：采用二级质谱碎片离子匹配，序列覆盖率≥80%，置信度阈值P<0.01

相对定量分析：基于TMT/iTRAQ标记技术，定量精度误差≤10%，可检测1.5倍以上表达差异

绝对定量检测：使用AQUA肽标准品，线性范围10amol-1pmol，R²>0.99

磷酸化修饰分析：TiO2富集效率>85%，位点定位分辨率±0.05Da

糖基化位点鉴定：PNGaseF酶解去糖基化，糖型识别灵敏度50fmol

蛋白相互作用谱：Co-IP耦合质谱检测，互作蛋白筛选阈值Fold Change≥3

二硫键定位：CID/ETD碎裂模式分析，定位准确率>92%

蛋白C端测序：羧肽酶Y酶解检测，序列覆盖长度15-20AA

热稳定性分析：CETSA技术检测融解温度，精度±0.5℃

蛋白复合物表征：Native-MS技术，分子量检测范围10kDa-2MDa

单细胞蛋白组学：nanoPOTS样品处理，最小检测细胞数=1

蛋白折叠状态监测：氢氘交换质谱，时间分辨率10ms

检测范围

疾病标志物筛查：血清/血浆样本中低丰度蛋白检测限0.1ng/mL

药物靶点研究：小分子-蛋白结合常数测定范围Kd=10nM-10mM

转基因生物分析：外源蛋白表达量检测精度±5%

疫苗效力评估：抗原表位覆盖率分析，误差率<3%

法医物证鉴定：毛发/血痕中种属特异性蛋白识别准确率>99%

食品过敏源检测：花生/牛奶等致敏蛋白检出限1ppm

细胞信号通路研究：磷酸化蛋白动态监测时间分辨率30min

微生物分类鉴定：特征肽段数据库比对物种>5000种

植物抗逆机制：胁迫响应蛋白变化监测动态范围10³

生物制药质控：单抗药物糖基化异质性分析分辨率0.1%

古蛋白质组学：骨骼化石中胶原蛋白存活时间>1万年

海洋生物毒素：贝类样品中石房蛤毒素检测限0.01mg/kg

检测标准

ISO 21386:2021 蛋白质组学定量分析技术规范

ASTM E3072-22 质谱法表征单克隆抗体标准指南

GB/T 38165-2019 人体蛋白质组学样本制备规程

ISO 20776-2:2023 临床微生物蛋白标志物检测

GB/T 40219-2021 食品中过敏原蛋白质质谱检测法

EU 2021/808 动物源性产品物种鉴定质谱标准

ISO 20914:2019 医学实验室定量测量不确定度要求

GB/T 38636-2020 蛋白质N-糖基化质谱分析通则

USP<1058> 分析仪器确认指南

ISO 5725-6:2020 质谱数据准确度验证方法

检测仪器

Q Exactive™ HF-X轨道阱质谱仪：分辨率240,000@m/z 200，实现肽段超灵敏鉴定

timsTOF Pro 4D质谱系统：离子淌度分离分辨率>130，提升磷酸化肽段检测通量200%

Orbitrap Eclipse™三合一质谱：ETD/HCD双碎裂模式，糖肽解析效率提升80%

Vanquish Neo UHPLC系统：耐压范围1300bar，实现1.7μm粒径色谱柱分离

nanoElute®纳流色谱：流速范围50-1000nL/min，单细胞样本分离稳定性CV<5%

CaptiveSpray™离子源：纳升电喷雾电离，离子化效率>30%

Evosep One高通量系统：每日样本处理量60-480个，梯度时间5-30min

Proteograph™工作站：自动化样品处理通量达96样/批次，减少人为误差

MALDI-8020组织成像仪：空间分辨率5μm，组织切片蛋白原位定位精度±10μm

Spectroswiss HX-1氢氘交换模块：氘代时间控制精度±0.1s，蛋白构象动态监测