肽序列质谱验证

检测项目

分子量测定：通过高分辨率质谱精确测定肽的分子量，与理论分子量进行比较，确认肽的整体组成是否正确。

从头测序分析：利用串联质谱产生的碎片离子信息，在不依赖数据库的情况下推导出肽段的氨基酸排列顺序。

数据库搜索鉴定：将实验获得的质谱数据与蛋白质或肽序列数据库进行比对，确认目标肽的身份。

翻译后修饰鉴定：识别并定位肽链上发生的磷酸化、糖基化、乙酰化等化学修饰及其具体位点。

二硫键定位分析：确定肽链内或肽链间二硫键的连接方式与位置，评估其正确的空间结构。

序列覆盖度评估：计算通过质谱碎片离子验证的氨基酸残基占整个肽序列的比例，评估验证的完整性。

同位素分布拟合：分析实验测得的同位素峰形与理论计算分布的匹配度，辅助确认分子式。

碎片离子指认：对串联质谱图中产生的b系列和y系列等碎片离子进行系统性的归属和解析。

<强>C端和N端确认: 通过特定的酶解或化学降解方法结合质谱分析，验证肽链的羧基末端和氨基末端序列。

<强>杂质肽序列分析: 对样品中存在的非目标肽杂质进行序列鉴定，评估主成分的纯度及相关杂质性质。

检测范围

合成多肽药物: 针对通过固相或液相合成法制备的治疗性多肽原料药及其中间体进行序列验证。

<强>重组表达多肽: 对利用基因工程技术在微生物或细胞系统中表达的重组多肽产品进行序列正确性确认。