豌豆源成分数字PCR定量检测

检测项目

豌豆源性特异性基因片段定量检测：针对豌豆基因组中高度特异的DNA序列进行设计与验证，确保检测方法仅对豌豆源性成分产生扩增信号。

内参基因定量检测：选用植物通用内参基因作为质量控制指标，用于评估样品DNA提取效率及PCR反应体系的稳定性。

DNA提取质量评估：对样品中提取的DNA进行浓度、纯度及完整性分析，确保模板DNA符合数字PCR检测要求。

引物与探针特异性验证：通过生物信息学分析和实验验证，确认所使用的引物和探针仅与目标豌豆基因序列结合。

微滴生成效率校准：评估微滴生成仪产生的微滴数量与均一性，确保每个反应单元的有效分区。

荧光信号阈值设定：根据阴性对照和阳性对照的荧光强度，确定区分阳性微滴与阴性微滴的临界值。

拷贝数浓度计算：基于泊松分布统计模型，将阳性微滴比例转换为样品中目标DNA分子的绝对拷贝数浓度。