蛋白纯度分析

检测项目

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳：该方法依据蛋白质分子量大小进行分离，通过染色和光密度扫描对蛋白条带进行半定量分析，评估样品纯度及是否存在降解或聚合。

高效液相色谱：利用固定相和流动相对蛋白质混合物进行分离，通过紫外或荧光检测器对洗脱组分进行定量，可精确计算目标蛋白的峰面积百分比。

毛细管电泳：在极细的毛细管内利用高压电场分离蛋白质，具有高分辨率和高灵敏度，适用于分析电荷异质体和微量样品纯度。

紫外-可见分光光度法：基于蛋白质中酪氨酸和色氨酸残基在280纳米处的特征吸收，通过吸光度值快速估算蛋白浓度并初步判断纯度。

质谱分析：通过测定蛋白质的质荷比进行定性和定量分析，能够准确鉴定目标蛋白分子量并检测共洗脱的杂质或翻译后修饰变体。

酶联免疫吸附测定：利用抗原抗体特异性反应，通过酶标二抗催化底物显色进行定量，特异性检测目标蛋白含量并计算其相对于总蛋白的纯度。

静态光散射：通过测量溶液中蛋白质分子对激光的散射强度，在不依赖标准品的情况下直接测定绝对分子量和聚集体的存在。

圆二色谱：基于蛋白质手性生色团对左右圆偏振光吸收差异的分析技术，用于评估蛋白质二级结构组成及其变化对纯度的影响。

分析型超速离心：根据蛋白质在强大离心力场中的沉降速度差异进行分离和分析，可用于检测寡聚状态、聚集体和片段化情况。

WesternBlotting：将电泳分离的蛋白质转移至膜上，利用特异性抗体进行杂交检测，用于确认目标蛋白的身份并评估交叉反应性杂质。

检测范围

重组治疗性抗体：包括单克隆抗体、双特异性抗体等，需精确测定其单体含量并检测高分子量聚集体和低分子量片段等杂质。

疫苗抗原蛋白：如病毒样颗粒或重组亚单位疫苗的关键抗原成分，纯度分析关乎疫苗的免疫原性和安全性评价。

酶制剂：用于工业催化或诊断试剂的核心酶类，其比活性高度依赖于蛋白纯度，需排除杂酶及失活酶分子的干扰。