糖基化DNA损伤响应测试

检测项目

8-氧代鸟嘌呤含量测定：定量分析DNA中8-氧代鸟嘌呤的丰度，该碱基修饰是活性氧攻击导致的典型糖基化损伤标志物。

脱氧核苷酸池氧化水平检测：评估细胞内游离脱氧核苷酸前体的氧化损伤程度，反映DNA复制前的底物质量控制状态。

OGG1糖苷酶活性分析：测定8-氧代鸟嘌呤DNA糖苷酶的切割活性，该酶特异性识别并启动氧化碱基的切除修复。

APE1内切核酸酶活性检测：评估脱嘌呤/脱嘧啶内切核酸酶在碱基切除修复通路中切割DNA骨架的能力。

γH2AX焦点形成实验：通过免疫荧光检测组蛋白H2AX磷酸化位点，作为DNA双链断裂响应的早期敏感指标。

ATM/ATR激酶磷酸化水平测定：分析ATM和ATR激酶的活化状态，二者是DNA损伤应答信号通路的核心调控因子。

Chk1/Chk2磷酸化检测：评估下游效应激酶Chk1和Chk2的磷酸化水平，反映细胞周期检查点通路的激活程度。

细胞周期分布分析：通过流式细胞术检测细胞周期各时相比例变化，评估损伤引发的细胞周期阻滞效应。

彗星实验（单细胞凝胶电泳）：在单细胞水平定量检测DNA链断裂程度，评估整体DNA损伤与修复动力学。

克隆形成存活assay:测定经糖基化损伤剂处理后细胞的长期增殖能力，综合评价细胞修复机制的有效性。

检测范围

体外培养的哺乳动物细胞系:适用于HeLa、HEK293、MEF等常用细胞模型，用于研究不同遗传背景下的损伤响应机制。

原代分离的人体淋巴细胞:利用外周血淋巴细胞评估个体对氧化应激的敏感性及DNA修复能力的差异。

临床组织标本（石蜡包埋或冷冻）:对肿瘤组织或病变组织进行回顾性分析，探索糖基化损伤与疾病发生发展的关联。