AAV载体分子生物学分析

检测项目

载体基因组滴度测定：通过定量PCR或数字PCR技术精确测定单位体积内包含目标基因组的病毒颗粒数量，评估载体产品的有效成分含量。

空壳率与完整率分析：利用分析型超速离心或电子显微镜技术区分空壳病毒颗粒与完整病毒颗粒的比例，确保产品具有预期的感染效率。

ITR序列完整性验证：采用测序或限制性内切酶图谱分析方法确认腺相关病毒基因组两端反向末端重复序列的结构完整性与正确性。

重组腺相关病毒纯度检测：通过高效液相色谱或光谱分析法测定病毒制剂中宿主细胞蛋白、DNA残留及其他工艺相关杂质的含量。

复制型腺相关病毒检测：使用对野生型腺病毒敏感的细胞系进行培养，检测是否存在具有自主复制能力的重组腺相关病毒污染物。

外源病毒因子筛查：应用多种细胞系培养及分子生物学方法系统检测病毒种子库或终产品中可能存在的各类外源病毒污染。

载体基因组全长序列确认：通过下一代测序技术对重组腺相关病毒载体的整个基因组进行测序，验证插入基因序列的正确性与完整性。

表达盒功能活性验证：在体外细胞模型中验证载体携带的表达盒能否驱动目的基因的正确转录与翻译，评估其生物学功能。

载体颗粒粒径与均一性分析：利用动态光散射或纳米颗粒跟踪分析技术测定病毒颗粒的粒径分布及其物理均一性。

内毒素含量测定：采用鲎试剂凝胶法或显色法精确测定病毒制剂中的细菌内毒素水平，确保产品符合注射用制剂的生物安全标准。

检测范围

临床级基因治疗制剂：适用于用于人体临床试验的重组腺相关病毒载体的全面质量检定与放行检验。

科研用AAV病毒包装服务:涵盖实验室规模制备的各类血清型AAV载体的基本质量评估与特性鉴定服务。

AAV血清型鉴定与分型:针对不同AAV血清型的衣壳蛋白进行免疫学或分子生物学鉴定，确定其特异性与交叉反应性。