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禽肉致病菌多重PCR检测

禽肉致病菌多重PCR检测

禽肉致病菌多重PCR检测技术基于聚合酶链反应原理,同时识别多种病原体,提升检测效率。该方法涵盖沙门氏菌、弯曲杆菌等常见目标,确保禽肉食品安全性,操作严格遵循国际和国家标准规程,涉及DNA提取、扩增和产物分析关键步骤。.

检测项目

沙门氏菌检测:针对禽肉中沙门氏菌属病原体。检测参数包括invA基因序列,灵敏度达10CFU/g,扩增产物大小123bp。

弯曲杆菌检测:识别弯曲杆菌属如空肠弯曲菌。检测参数基于hipO基因,检出限为50CFU/g,扩增循环数35轮。

大肠杆菌O157:H7检测:监测产毒素大肠杆菌风险。检测参数涉及stx1和stx2基因,检测限20CFU/g,熔解曲线分析范围60-95C。

单核细胞增生李斯特菌检测:针对李斯特菌属致病株。检测参数包括hlyA基因,灵敏度15CFU/g,扩增产物长度234bp。

金黄色葡萄球菌检测:检测产肠毒素葡萄球菌。检测参数基于nuc基因,检出限30CFU/g,实时荧光阈值设定0.1。

产气荚膜梭菌检测:识别毒素生成梭菌。检测参数涉及cpe基因,检测限25CFU/g,扩增时间90分钟。

耶尔森菌检测:监测小肠结肠炎耶尔森菌。检测参数包括ail基因,灵敏度40CFU/g,产物电泳电压100V。

副溶血性弧菌检测:针对海鲜源弧菌交叉污染。检测参数基于tdh基因,检出限35CFU/g,熔解温度梯度70-85C。

蜡样芽孢杆菌检测:识别呕吐毒素产生菌。检测参数涉及ces基因,检测限45CFU/g,实时PCR荧光通道FAM。

志贺氏菌检测:监测痢疾志贺菌风险。检测参数包括ipaH基因,灵敏度20CFU/g,扩增产物大小150bp。

空肠弯曲菌亚型检测:细化弯曲菌分类。检测参数基于cadF基因,检出限55CFU/g,循环阈值Ct值范围15-30。

禽流感病毒检测:针对禽源病毒交叉污染。检测参数涉及HA基因,检测限10^3copies/g,实时检测通道HEX。

检测范围

新鲜禽肉:包括生鲜鸡肉、鸭肉和火鸡肉原料。

冷冻禽肉制品:涉及速冻鸡胸肉、鸭腿等低温储藏产品。

禽肉加工食品:涵盖禽肉香肠、肉丸和馅饼等熟制品。

禽肉汤类产品:包括即食鸡汤、鸭汤等液体类食品。

禽源宠物食品:涉及含禽肉成分的猫狗饲料成品。

禽肉腌制产品:涵盖盐渍或烟熏鸡鸭肉制品。

禽肉罐头:包括高温灭菌禽肉罐头类商品。

禽肉干制品:涉及风干鸡肉条、鸭肉干等脱水食品。

禽肉馅料:涵盖用于烘焙或烹饪的禽肉混合馅。

禽源生物样本:包括禽类养殖场环境拭子样本。

禽肉调味品:涉及含禽肉提取物的酱料和调味包。

禽肉快餐产品:涵盖炸鸡块、鸡米花等速食类商品。

检测标准

依据ISO6579进行沙门氏菌检测。

遵循ISO10272弯曲杆菌检测规范。

执行ISO16654大肠杆菌O157检测要求。

采用ISO11290单核细胞增生李斯特菌测定。

依据GB/T4789.10金黄色葡萄球菌检测规程。

遵循GB/T4789.13产气荚膜梭菌检测方法。

执行SN/T1870耶尔森菌检测标准。

采用GB/T4789.7副溶血性弧菌测定规范。

依据ISO7932蜡样芽孢杆菌检测要求。

参照GB4789.5志贺氏菌检测标准。

遵循ISO22174分子检测通用准则。

依据GB19489实验室生物安全通用要求。

检测仪器

PCR热循环仪:用于DNA模板扩增的设备。在本检测中执行多重PCR反应,控制温度循环实现目标基因复制。

实时荧光PCR系统:监测扩增过程的仪器。在本检测中实现产物实时定量,通过荧光信号分析致病菌浓度。

凝胶电泳装置:分离DNA片段的工具。在本检测中验证扩增产物大小,确认目标基因特异性。

核酸提取仪:自动化处理样本的装置。在本检测中纯化禽肉样品DNA,去除杂质并浓缩目标核酸。

生物安全柜:提供无菌操作环境的设备。在本检测中保障样品处理过程安全,防止交叉污染。

微量移液器:精确加样工具。在本检测中分配试剂和样本,确保反应体系准确性。

离心机:分离混合物的设备。在本检测中沉淀细胞碎片,提取上清液用于后续分析。