ISO 20486

本文围绕ISO 20486《体外诊断医疗器械-制造商为生物样品中量值提供计量溯源性信息》，详细阐述了其核心检测项目、适用范围、标准化的检测方法及所需的仪器设备，旨在建立体外诊断试剂的计量溯源性。

检测项目

校准品及正确度控制品的赋值：依据ISO 20486，为体外诊断试剂的校准品和正确度控制品赋予具有计量溯源性的量值。这是确保检测结果可比性的核心，其赋值需通过不间断的校准链，溯源至国际单位制（SI）或国际公认的参考测量程序。

测量不确定度评估：标准要求对校准品赋值的全过程进行测量不确定度评估。这包括识别不确定度来源（如参考物质、参考方法、样品分装等），量化各分量，并合成标准不确定度，最终为赋值结果提供可靠性区间。

基质效应验证：评估并确保校准品/正确度控制品的基质与临床患者样本具有互通性。ISO 20486强调需通过实验证明，在目标测量系统中，参考物质与真实患者样本的检测性能无显著差异，以保证溯源性传递的有效性。

计量溯源性链文件化：制造商必须建立并文件化完整的计量溯源性链。该文件应清晰描述从最终校准品到最高级参考物质和参考测量程序的每一步溯源路径、所使用的转换因子及相关的测量不确定度。

稳定性研究与监测：对已赋值的校准品和正确度控制品进行实时稳定性监测和加速稳定性研究。目的是确定其有效期，并确保在整个有效期内，赋值结果的偏移在预设的可接受标准之内。

检测范围

定量体外诊断试剂：ISO 20486主要适用于提供定量检测结果的体外诊断医疗器械，如检测血糖、胆固醇、心肌肌钙蛋白、糖化血红蛋白等项目的试剂盒。这些试剂的结果准确性直接依赖于校准品的准确赋值。

制造商提供的校准品：标准的核心范围是IVD制造商为其产品配套提供的专用校准品。这些校准品用于在临床实验室的常规测量系统上建立测定结果的准确性基准。

制造商提供的正确度控制品：同样适用于制造商提供的、具有定值的正确度验证物质。实验室使用这些控制品来监测测量系统的正确度性能，验证其是否与制造商声称的溯源性能一致。

基于参考测量程序的赋值过程：标准规定了当使用更高级别的参考测量程序（如同位素稀释质谱法）对校准品进行赋值时，应遵循的流程和质量控制要求，确保赋值过程的科学性与严谨性。

临床实验室量值比对：虽然主要面向制造商，但其建立的溯源性框架也为临床实验室间及实验室与参考实验室之间的量值比对（如室间质量评价）提供了技术基础，促进结果互认。

检测方法

参考测量程序（RMP）应用：依据ISO 20486，为校准品赋值时，应优先选用国际公认的参考测量程序。这些程序（如ID-LC/MS/MS）具有已知的测量不确定度，是计量溯源链中的关键环节，能提供最高的计量学水平。

校准层次传递方法：采用分层次的校准传递策略。从最高计量级别的有证参考物质（CRM）和RMP开始，通过中间级别的校准品，逐级将量值传递至工作校准品，每一级的传递都需评估和累加不确定度。

互通性验证实验设计：通常采用CLSI EP30-A指南推荐的方法，选取足够数量、覆盖临床相关浓度范围的患者样本，同时在参考测量系统和常规测量系统中进行检测，通过统计学方法（如差值图、Passing-Bablok回归）评估基质效应。

不确定度评定（GUM法）：遵循《测量不确定度表示指南》（GUM）的原则进行评定。采用“自下而上”的模型，系统分析赋值过程中参考物质的不确定度、参考方法的重复性与复现性、样本分装均匀性等所有显著不确定度分量。

稳定性评估的加速实验法：采用加速稳定性实验（如在升高温度条件下储存）结合Arrhenius模型，预测校准品在推荐储存条件下的长期稳定性，为设定有效期提供科学数据支持。

检测仪器设备

参考测量系统核心设备：执行最高级别赋值的实验室需配备如同位素稀释液相色谱-串联质谱仪（ID-LC/MS/MS）。该设备是建立许多小分子化合物（如代谢物、激素）SI单位溯源性的决定性设备，具有极高的特异性和灵敏度。

高精度自动化加样系统：在校准品赋值和互通性研究中，需要使用高精度的液体处理工作站或移液器，以确保样本、校准品和试剂分装的体积精准，减少由此引入的测量不确定度。

标准环境监控设备：包括高精度的恒温恒湿箱、超低温冰箱和温度连续监控记录仪。这些设备用于确保参考物质、校准品在制备、储存和运输全过程处于规定的环境条件下，保障其稳定性。

临床常规测量系统：即目标体外诊断检测平台，如全自动生化分析仪、化学发光免疫分析仪等。在互通性验证和最终校准品性能确认时，必须在这些常规系统上进行测试，以模拟真实的临床检测场景。

数据处理与统计软件：需要专业的计量学统计软件，用于进行测量不确定度的计算与合成、稳定性数据的趋势分析，以及互通性验证实验中的回归分析和偏差估计，确保数据分析符合标准要求。