本检测详细阐述了荧光定量移液检测技术,这是一种将高精度移液操作与荧光定量分析相结合的关键生物分析技术。本检测系统介绍了该技术涵盖的核心检测项目、广泛的检测范围、标准化的检测方法以及所需的关键仪器设备,为相关领域的科研与应用人员提供全面的技术参考。
核心优势
检测中心实验室配备国内外的前沿分析检测设备,检测报告获得CNAS、CMA双重认证,国际互认。
检测流程
检测项目
核酸绝对定量分析:通过构建标准曲线,对样品中特定DNA或RNA模板的起始拷贝数进行精确定量。
基因表达相对定量分析:比较不同处理组或不同时间点样本间目标基因的表达差异,通常以内参基因进行归一化。
单核苷酸多态性分型:利用特异性探针或高分辨率熔解曲线,鉴别样本中特定的单碱基差异。
病原体核酸检测:快速、灵敏地检测病毒、细菌等病原体的特异性核酸序列,用于感染诊断。
转基因成分鉴定:定性及定量检测食品、农产品中是否含有外源转基因成分及其含量。
microRNA表达谱分析:对微小的非编码RNA分子进行定量,研究其在基因调控及疾病中的作用。
甲基化水平检测:通过重亚硫酸盐处理等方法,定量分析特定基因启动子区域的DNA甲基化程度。
拷贝数变异分析:检测基因组特定区域拷贝数的增加或缺失,与多种遗传疾病相关。
细胞因子mRNA表达量检测:定量分析免疫细胞中各类细胞因子转录水平的变化。
药物靶点基因表达监控:在药物研发或治疗过程中,监测特定靶点基因的表达响应。
检测范围
临床诊断样本:包括血清、血浆、全血、尿液、痰液、组织切片等人体来源样本。
生命科学研究样本:涵盖细胞培养物、细菌菌液、动植物组织、总RNA、基因组DNA等。
食品安全监测样本:包括加工食品原材料、成品、饲料等中的微生物及转基因成分。
环境监测样本:如水体、土壤、空气颗粒物中特定微生物或病原体的核酸污染。
法医物证样本:对痕量DNA样本进行STR分析或性别鉴定等,要求极高的灵敏度。
病原体耐药性检测:检测病原体基因中与耐药性相关的突变位点。
肿瘤标志物检测:定量检测循环肿瘤DNA或与癌症相关的特异性基因突变及表达。
遗传病筛查样本:对羊水、绒毛膜等产前样本进行特定遗传病相关基因的检测。
疫苗质量监控:检测疫苗制品中核酸类成分的浓度与完整性。
基因编辑效果验证:精确量化经过CRISPR等工具编辑后的基因敲除或敲入效率。
检测方法
TaqMan探针法:使用序列特异性荧光探针,在PCR延伸阶段发生水解,释放荧光信号进行检测,特异性极高。
SYBR Green I染料法:利用能结合双链DNA的小分子染料发出荧光,成本较低,但需配合熔解曲线分析以确保特异性。
分子信标法:采用茎环结构的探针,仅在与靶序列完全配对时展开并发出荧光,背景信号低。
双重或多重荧光PCR:在同一反应体系中,使用不同荧光标记的探针同时检测多个靶标,提高通量。
数字PCR:将反应体系分割成数万个微单元进行独立PCR,通过计数阳性单元实现绝对定量,不依赖标准曲线。
高分辨率熔解曲线分析:通过监测升温过程中双链DNA解链时的荧光变化,鉴别序列差异,适用于SNP分型和突变扫描。
逆转录荧光定量PCR
等温扩增结合荧光检测:如环介导等温扩增技术,在恒定温度下扩增并实时监测荧光,便于现场快速检测。
微滴式数字PCR
绝对定量的标准曲线法
检测仪器设备
实时荧光定量PCR仪
数字PCR系统
自动化液体处理工作站
精密移液器
高速冷冻离心机
核酸蛋白浓度测定仪
生物安全柜/超净工作台
-80°C超低温冰箱
涡旋振荡器与掌上离心机
电泳系统或芯片分析仪
