细胞rna提取trizol检测

检测项目

RNA浓度：紫外分光光度法测定260nm吸光度，检测范围0.1-2000ng/μL，误差±5%

A260/A280比值：评估蛋白质污染，合格标准1.8-2.1，分辨率0.01单位

A260/A230比值：检测有机溶剂残留，阈值≥2.0，灵敏度0.05单位

RNA完整性值：微流控电泳分析，检测范围1-10，分辨率0.1

DNA残留量：荧光定量PCR检测，检出限0.01%，参照18S基因

蛋白质污染：BCA法测定，灵敏度0.5μg/mL

酶抑制物检测：RT-qPCR扩增效率评估，偏差≤5%

降解产物分析：琼脂糖凝胶电泳，分辨率100-6000nt

内毒素含量：鲎试剂法测试，限值<0.1EU/μg

pH值检测：微电极测定，范围4.0-8.0，精度±0.1

等电点分析：毛细管等电聚焦，分辨率0.01pH单位

粒径分布：动态光散射仪，检测范围0.3nm-10μm

检测范围

动物组织样本：心肝脾肺肾等器官组织，需液氮速冻处理

培养细胞系：贴壁/悬浮细胞，推荐细胞量>10⁶个

血液样本：全血/血清/血浆，适用PAXgene管保存

植物材料：叶片/根茎/种子，需去除多糖干扰

微生物样本：细菌/酵母/真菌，含细胞壁破壁步骤

法医样本：毛发/唾液斑痕，适用微量提取方案

石蜡包埋组织：需二甲苯脱蜡及蛋白酶K消化

环境样本：土壤/水体微生物，含腐殖酸去除工艺

临床体液：脑脊液/尿液/胸腹水，低丰度RNA富集

古生物样本：化石/琥珀标本，防RNA酶污染处理

食品基质：肉类/乳制品病原体检测，需去除脂肪

转基因生物：外源基因表达分析，含载体序列验证

检测标准

ISO 20391-1:2018细胞计数标准-第1部分实验方法

GB/T 34796-2017 核酸浓度与纯度测定（紫外分光光度法）

ASTM E3135-18 核酸样本制备标准指南

ISO 21571:2005 食品中核酸提取方法

GB/T 37872-2019 高通量测序样本质量要求

CLSI MM13-A 分子诊断样本制备规范

ISO 20166-3:2018 福尔马林固定石蜡包埋组织处理

GB/T 30988-2014 多酚多糖植物RNA提取方法

EN ISO 22174 食品微生物分子检测通则

YY/T 1256-2015 体外诊断试剂RNA保存液标准

检测仪器

紫外分光光度计：测定RNA浓度及A260/A280比值，波长精度±1nm

微流控电泳仪：评估RNA完整性，芯片分离分辨率3s/样本

荧光定量PCR仪：检测DNA残留，温度均一性±0.2℃

超微量核酸分析仪：双光束检测，样本量需求0.5μL

低温高速离心机：最大转速24,000rpm，温控范围-20℃~40℃

生物分析仪：自动生成RIN值，检测限0.1ng/μL

酶标仪：BCA法测蛋白质污染，波长范围340-850nm

超低温冰箱：样本长期保存，温度稳定性-80℃±3℃

超声波破碎仪：组织匀浆处理，功率范围50-1500W

真空浓缩离心机：RNA干燥复溶，控温精度±0.5℃