细胞毒性测验检测

检测项目

细胞存活率测定：采用MTT法或CCK-8试剂盒检测，灵敏度达10³细胞/孔，结果以相对存活率百分比表示。

乳酸脱氢酶（LDH）释放量：通过比色法量化膜完整性破坏，检测限0.2 U/L，线性范围1-500 U/L。

细胞形态学分析：使用倒置显微镜观察24/48/72小时细胞病变，按ISO 10993-5标准分级记录胞质收缩、空泡化等异常。

克隆形成抑制试验：计算贴壁细胞集落形成数量，抑制率检测精度±5%。

细胞周期阻滞检测：流式细胞术分析G0/G1、S、G2/M期分布比例，分辨率±1.5%。

凋亡率定量：Annexin V/PI双染法检测早期凋亡，可识别10⁴细胞中≥2%的凋亡群体。

线粒体膜电位变化：JC-1荧光探针法测定红绿荧光比值，偏差范围<0.15。

炎症因子释放：ELISA检测IL-6、TNF-α浓度，最低检出量1 pg/mL。

DNA损伤彗星试验：单细胞凝胶电泳测定尾矩值，可识别0.1 Gy辐射当量损伤。

代谢活性图谱：Seahorse分析仪实时监测耗氧率(OCR)和细胞酸化率(ECAR)，数据采集间隔30秒。

活性氧（ROS）生成：DCFH-DA荧光法检测自由基水平，灵敏度为对照组的150%基准阈值。

细胞迁移抑制：Transwell小室定量穿膜细胞数，重复性误差<8%。

检测范围

医用植入材料：心脏支架、人工关节等金属/聚合物器件的浸提液测试，评估长期生物相容性风险。

药品包装材料：检测输液袋、胶塞等直接接触药品的塑料溶出物毒性。

齿科修复材料：树脂、陶瓷等口腔修复体成分的细胞应答分析。

体外诊断试剂盒：验证培养板、检测试纸等耗材的细胞安全性。

美容注射填充剂：透明质酸、胶原蛋白等材料的成纤维细胞相容性测试。

组织工程支架：生物降解聚合物对干细胞增殖分化的影响评估。

纳米药物载体：量子点、脂质体等纳米颗粒的胞内转运毒性研究。

手术缝合线：可吸收缝线降解产物对上皮细胞的毒性作用。

医用消毒剂：含氯/醛类消毒液残留的细胞膜损伤检测。

基因治疗载体：病毒载体转染后的宿主细胞存活率监控。

骨科固定器械：钛合金螺钉金属离子释放的成骨细胞毒性。

介入导管材料：硅胶、聚氨酯导管表面涂层致溶血效应评估。

检测标准

ISO 10993-5:2009 医疗器械生物学评价第5部分：体外细胞毒性试验。

GB/T 16886.5-2017 医疗器械生物学评价 体外细胞毒性试验。

ASTM F813-20 医疗器械材料直接接触细胞培养评估规程。

USP <87> 体外生物反应性试验 琼脂扩散法及直接接触法。

OECD TG 487 体外哺乳动物细胞微核试验国际指南。

GB/T 14233.2-2005 医用输液、输血、注射器具检验方法 生物试验。

ISO 7405:2018 牙科学 牙科器械生物相容性评价。

EN ISO 14971:2019 医疗器械风险管理应用。

JJF 1815-2020 细胞毒性检测试剂盒校准规范。

ASTM E2526-22 纳米材料体外细胞毒性标准指南。

检测仪器

多功能酶标仪：配备540nm/630nm双波长滤光片，实现MTT、LDH等96孔板高通量吸光度检测。

流式细胞仪：四激光十色配置，同步分析细胞凋亡、周期及ROS荧光信号，通量>10⁴细胞/秒。

倒置荧光显微镜：20×-100×相差物镜搭配GFP/RFP通道，实时记录活细胞动态形态变化。

细胞能量代谢分析系统：整合OCR/ECAR探针，持续监测6小时线粒体呼吸链功能。

全自动细胞计数仪：基于台盼蓝排斥法，精度±3%，支持0-10⁷ cells/mL浓度范围。

恒温CO₂培养箱：三气控制（O₂/CO₂/N₂），温度波动<0.1℃，保障长期培养稳定性。

高通量电泳仪：彗星试验专用平台，电场强度0-30V/cm可调，图像分析软件自动计算尾矩。

超低温生物样本库：-150℃液氮存储系统，确保细胞株及检测样本长期活性。