水质菌落总数检测

检测项目

菌落总数测定：采用平板倾注法，测定范围1-1000 CFU/mL，适用于不同稀释倍数样本。

样品稀释操作：标准稀释系列为1:10、1:100、1:1000，确保计数在有效范围。

培养基选择：使用营养琼脂，pH值7.0-7.2，添加氯化钠1.5-2.0 g/L以模拟生理环境。

培养条件控制：恒温37°C培养48小时，湿度控制60-70%，防止平板干燥。

菌落计数规则：仅计数30-300 CFU/平板区间，超出范围需重测稀释度。

结果计算方法：CFU/mL = (平均菌落数 × 稀释倍数) / 样品接种体积（通常1 mL）。

质量控制测试：平行样相对标准偏差≤10%，确保重复性。

无菌操作流程：超净工作台处理样品，空气洁净度100级。

空白对照设置：每批次培养基和稀释液均需无菌测试，菌落数应为0。

菌落形态鉴定：辅助显微镜观察，区分典型细菌形态如圆形、光滑边缘。

温度校准验证：培养箱温度波动±0.5°C，每日校准。

样品储存规范：采集后4°C冷藏，检测时间≤24小时。

稀释水质量控制：使用无菌蒸馏水，电导率≤5 μS/cm。

培养平板厚度：琼脂层厚度4-5 mm，确保均匀生长。

误差分析处理：统计变异系数CV＜15%，通过标准曲线校准。

检测范围

饮用水：生活饮用水源监测，保障微生物安全指标达标。

工业废水：工厂排放水评估，控制污染物流入环境。

游泳池水：公共泳池卫生管理，预防感染性疾病传播。

地表水体：河流、湖泊水质常规监控，支撑生态评估。

地下水系统：饮用水井水源检测，防范地下水污染。

瓶装水产品：商业饮用水安全验证，符合包装水标准。

水产养殖用水：鱼类养殖池环境控制，优化生物健康。

冷却循环水：工业冷却系统微生物抑制，防止设备腐蚀。

食品加工用水：食品生产原料水检验，确保加工卫生。

医药纯水系统：制药用水无菌度核查，满足GMP规范。

雨水收集系统：雨水再利用安全性评价，处理前后对比。

景观水体：公园喷泉水质维护，防止藻类滋生。

农业灌溉水：农田用水微生物负荷监测，保护作物安全。

实验室纯水：科研用水纯度验证，排除背景干扰。

船舶压载水：国际航运水处理评估，防止物种入侵。

检测标准

ISO 6222:1999 水质 - 菌落总数测定方法，培养条件37°C/48小时。

GB/T 5750.12-2006 生活饮用水标准检验方法 微生物指标，包括平板计数法。

ASTM D5465-93 水中细菌总数标准测试方法，规定样品处理步骤。

EPA Method 1604 美国环保署水质微生物分析规范，涵盖淡水与海水。

GB 5749-2006 生活饮用水卫生标准，限值≤100 CFU/mL。

ISO 9308-1:2014 水质大肠菌群检测关联方法，辅助菌落总数分析。

EN ISO 7899-2:2000 欧洲水质微生物检测标准，强调培养基选择。

JIS K 0350-1990 日本工业标准水质试验方法，涉及计数精度。

GB/T 8538-2016 饮用天然矿泉水检验方法，扩展菌落总数应用。

ISO 5667-3:2018 水质采样指南，确保代表性样品采集。

ASTM E2562-2012 水中微生物测试质量控制标准。

GB 17324-2003 瓶装饮用纯净水标准，结合菌落总数限值。

ISO 8199:2018 水质通用微生物检测原则，提供基础框架。

GB/T 12999-2012 水质采样样品的保存和管理技术规范。

EPA 600/4-84/076 水中细菌标准操作规程，详述培养细节。

检测仪器

恒温培养箱：提供精确37°C恒温环境，温度控制精度±0.5°C，确保菌落均匀生长。

高压蒸汽灭菌器：用于培养基、玻璃器皿灭菌，操作压力103 kPa，温度121°C，时长15分钟。

自动菌落计数器：配备图像分析软件，计数精度±1 CFU，减少人工误差。

生物安全柜：提供ISO Class 5洁净环境，保护样品免受外界污染。

pH计：测量培养基pH值，分辨率0.01，确保7.0-7.2范围。

无菌采样瓶：容积100 mL，带密封盖，用于水样采集与运输。

显微镜：放大倍数40-400×，辅助菌落形态鉴定区分杂菌。

振荡混匀器：转速0-300 rpm，均匀混匀稀释样品。

电子天平：称量精度0.001 g，用于培养基成分调配。

水质多参数测定仪：监测样品电导率、温度等背景参数，支持综合分析。