本检测系统阐述了动物模型研究中组织检测的核心技术体系。文章详细介绍了从宏观到微观、从结构到功能的四大关键模块:涵盖病理、分子、细胞等多个维度的检测项目;针对不同器官系统的检测范围;包括组织学、免疫学、分子生物学在内的主流检测方法;以及支撑这些技术实施的关键仪器设备。为利用动物模型进行疾病机制研究、药效与安全性评价提供全面的技术参考。
核心优势
检测中心实验室配备国内外的前沿分析检测设备,检测报告获得CNAS、CMA双重认证,国际互认。
检测流程
检测项目
组织病理学检查:通过显微镜观察组织切片,评估细胞形态、组织结构异常、炎症、坏死、纤维化等基本病理变化。
免疫组织化学:利用抗原-抗体特异性反应,在组织原位检测特定蛋白质(如细胞标志物、信号通路蛋白)的表达与定位。
原位杂交:在组织切片上使用标记的核酸探针,检测特定DNA或RNA序列的分布与表达水平,用于基因定位和病毒检测。
TUNEL检测:通过标记DNA断裂末端,特异性检测组织中的细胞凋亡情况,评估药物或疾病模型的细胞死亡水平。
特殊染色:运用如Masson(胶原纤维)、油红O(脂质)、普鲁士蓝(铁)等化学染色方法,特异性地显示特定组织成分。
透射电镜观察:利用高分辨率电子显微镜观察细胞的超微结构,如线粒体、内质网、突触等细胞器的病理改变。
组织匀浆生化检测:将组织研磨匀浆后,测定其中酶活性(如SOD、CAT)、代谢产物(如MDA)、离子浓度等生化指标。
组织芯片分析:将数十至数百个微小组织样本规则排列于一张载玻片上,进行高通量的原位分子表达谱分析。
微血管密度计数:通过CD31等血管内皮标志物染色,定量分析肿瘤或缺血区域的新生血管生成情况。
炎症细胞浸润评估:通过特定细胞标志物(如CD68 for巨噬细胞)染色,对组织内炎症细胞的类型和数量进行定性定量分析。
检测范围
中枢神经系统组织:包括大脑皮层、海马、小脑、脊髓等,用于研究神经退行性疾病、脑卒中、脑损伤等模型。
心血管系统组织:涵盖心脏(心肌)、主动脉、冠状动脉等,用于评估心肌梗死、高血压、动脉粥样硬化等模型。
肝脏组织:是药物代谢、毒性评价以及脂肪肝、肝纤维化、肝癌等疾病模型的核心检测对象。
肾脏组织:用于评估急慢性肾病模型、药物肾毒性,观察肾小球、肾小管的结构与功能变化。
肺脏组织:适用于肺炎、肺纤维化、肺癌、哮喘等呼吸系统疾病模型的肺泡结构、炎症及纤维化程度分析。
消化系统组织:包括胃、肠道(小肠、结肠)等,用于研究胃炎、肠炎、结肠癌及肠道屏障功能模型。
骨与关节组织:如骨骼、关节软骨,用于骨质疏松、关节炎、骨折愈合等模型的骨密度、软骨破坏及修复评估。
肿瘤组织:移植瘤或自发瘤模型的组织,用于评估肿瘤增殖、凋亡、血管生成、侵袭转移等特性。
皮肤组织:用于创伤愈合、皮炎、皮肤癌等模型,检测表皮增生、真皮炎症及胶原重塑等情况。
肌肉组织:包括骨骼肌和心肌,用于肌营养不良、肌肉萎缩、心肌病等模型的肌纤维形态和功能研究。
检测方法
石蜡切片技术:组织经固定、脱水、透明、浸蜡后包埋成块并切片,是常规病理学和IHC的经典制备方法。
冰冻切片技术:组织不经脱水包埋,直接快速冷冻后切片,能较好地保存抗原活性和脂类成分,用于快速诊断和某些IHC/ISH。
苏木精-伊红染色:最基础的组织学染色方法,苏木精将细胞核染成蓝色,伊红将细胞质和胶原染成粉红色,用于整体形态观察。
免疫荧光法:用荧光素标记的抗体进行染色,通过荧光显微镜观察,可实现多色标记和亚细胞定位,灵敏度高。
酶联免疫吸附测定:从组织中提取总蛋白,利用ELISA技术定量检测其中特定细胞因子、激素或信号分子的含量。
Western Blotting:从组织匀浆中提取蛋白质,通过电泳分离、转膜及抗体孵育,半定量检测特定蛋白的表达量及修饰状态。
聚合酶链反应:从组织中提取RNA或DNA,通过RT-qPCR或qPCR技术定量检测特定基因的mRNA或DNA拷贝数变化。
激光捕获显微切割:在显微镜下从异质性组织中精准分离出特定类型的细胞或病变区域,用于后续分子生物学分析。
数字病理扫描与分析:将整个组织切片高分辨率数字化,利用图像分析软件对染色区域进行定量分析,提高客观性和通量。
组织流式细胞术:将实体组织消化成单细胞悬液,利用流式细胞仪对细胞表面和内部标志物进行多参数定量分析。
检测仪器设备
石蜡包埋机与切片机:用于将处理好的组织浸入液态石蜡中包埋成块,并用精密机械臂切片以获得数微米厚的连续切片。
冷冻切片机:在低温环境下(-20°C至-30°C)对新鲜或固定后冷冻的组织进行切片,常用于快速病理和保存抗原。
自动组织脱水机:自动完成组织从固定到浸蜡前的梯度酒精脱水、透明等系列步骤,保证处理质量均一并提高效率。
自动染色机:可编程控制H&E染色、特殊染色甚至免疫组化染色的全过程,实现染色标准化,减少人为误差。
光学显微镜:观察H&E及特殊染色切片的基础设备,配备明场、暗场、相差等功能,用于初步病理诊断和形态分析。
荧光显微镜:配备特定激发/发射滤光片组,用于观察免疫荧光或多重荧光标记的组织切片,可进行共定位研究。
共聚焦激光扫描显微镜:利用针孔消除离焦光,获得高分辨率光学切片和三维重建图像,是亚细胞结构定位的利器。
数字切片扫描仪:自动将整张玻片高速、高分辨率扫描成数字图像,便于存储、远程共享和后续计算机图像分析。
透射电子显微镜:利用电子束穿透超薄切片成像,提供纳米级分辨率的细胞超微结构信息,是亚细胞病理诊断的金标准。
多功能酶标仪:用于读取ELISA、细胞活性检测等实验的吸光度、荧光或化学发光信号,实现组织匀浆生化指标的高通量定量。
