本检测详细阐述了组织样本中表达量分析的核心技术流程。文章系统性地介绍了该分析所涵盖的关键检测项目、广泛的检测范围、主流的分子生物学与生物信息学检测方法,以及支撑整个分析流程所必需的精密仪器设备。内容旨在为从事生命科学、医学研究和临床诊断的专业人员提供一份全面的技术参考。

核心优势

检测中心实验室配备国内外的前沿分析检测设备,检测报告获得CNAS、CMA双重认证,国际互认。

检测流程

1 需求沟通
2 方案定制
3 取样/送检
4 实验检测
5 数据分析
6 出具报告

检测项目

mRNA表达量分析:定量检测特定基因信使RNA在组织中的丰度,是研究基因功能与调控的核心。

微小RNA(miRNA)表达谱:分析小分子非编码RNA的表达水平,用于研究其在转录后调控、细胞分化及疾病中的作用。

长链非编码RNA(lncRNA)分析:检测长度超过200个核苷酸的非编码RNA,探索其在表观遗传调控、细胞周期等复杂生物学过程中的功能。

环状RNA(circRNA)检测:定量分析呈闭合环状结构的非编码RNA,研究其作为分子海绵或生物标志物的潜力。

基因融合检测:识别由染色体易位、缺失等产生的融合基因及其表达产物,对肿瘤分型与靶向治疗至关重要。

可变剪接异构体分析:区分同一基因通过不同剪接方式产生的多种mRNA变体,揭示其在组织特异性与疾病中的差异。

免疫相关基因表达谱:定量分析免疫细胞标志物、细胞因子、趋化因子等,用于评估肿瘤微环境或免疫状态。

代谢通路关键基因表达:聚焦于特定代谢途径(如糖酵解、氧化磷酸化)中酶和调控因子的表达水平。

药物靶点基因表达:检测潜在药物作用靶点基因的表达量,为药物疗效预测和耐药性研究提供依据。

内参基因验证:评估候选内参基因(如GAPDH,β-actin)在不同样本中的表达稳定性,以确保定量数据的准确性。

检测范围

人类各类组织标本:包括手术切除的肿瘤组织、癌旁正常组织、活检穿刺组织以及尸检组织等。

实验动物组织:涵盖小鼠、大鼠、斑马鱼等模式生物的器官与病变组织,用于疾病模型研究。

石蜡包埋(FFPE)组织:对临床存档的福尔马林固定石蜡包埋组织进行回顾性研究,挖掘其分子信息。

冰冻组织:使用液氮或-80°C快速冷冻保存的组织,能更好地保持RNA的完整性和天然状态。

特定解剖区域显微切割组织:通过激光捕获显微切割技术获取特定细胞群或病变区域,提高分析的特异性。

干细胞与类器官:分析多能干细胞、成体干细胞及其分化形成的类器官模型中基因表达的动态变化。

胚胎发育不同阶段组织:研究在胚胎发育过程中,不同组织器官基因表达的时序性调控网络。

植物组织样本:包括根、茎、叶、花、果实等,用于研究植物生长发育、抗逆反应等生物学问题。

感染或炎症病变组织:分析病原体感染部位或慢性炎症区域宿主与病原体的基因表达互作。

移植组织与异种移植物:评估移植后组织的存活状态、排斥反应相关基因的表达特征。

检测方法

实时荧光定量PCR(qRT-PCR):基于逆转录和荧光探针/染料的黄金标准方法,适用于少量基因的高灵敏、精确定量。

高通量RNA测序(RNA-Seq):全面、无偏地检测所有转录本,可发现新转录本、精确量化已知基因及分析可变剪接。

微阵列基因芯片:基于已知序列探针的高通量筛查技术,适用于大规模样本的已知基因表达谱分析。

数字PCR(dPCR):将样本分割至数万个微反应单元进行独立PCR,实现无需标准曲线的绝对定量,灵敏度极高。

原位杂交(ISH):利用标记的核酸探针在组织切片原位检测特定RNA,可在形态学背景下定位表达位置。

单细胞RNA测序(scRNA-Seq):在单个细胞水平解析组织内细胞的异质性,绘制细胞图谱并发现新的细胞亚群。

空间转录组学:结合组织原位信息与高通量测序,获得转录本在组织空间位置上的分布数据。

Northern Blot:经典的RNA检测技术,通过电泳分离和探针杂交验证RNA的大小和表达量,但通量较低。

核酸酶保护实验(RPA/S1):利用特异性核酸酶消化单链核酸,通过保护片段分析特定转录本的量和结构。

纳米孔直接RNA测序:无需逆转录和PCR扩增,直接对天然RNA分子进行长读长测序,可检测RNA修饰。

检测仪器设备

实时荧光定量PCR仪:进行qRT-PCR实验的核心设备,能够实时监测PCR循环中的荧光信号变化。

高通量测序仪:如Illumina NovaSeq, HiSeq系列,是执行RNA-Seq、scRNA-Seq等测序项目的关键平台。

微阵列扫描仪:用于扫描基因芯片杂交后的荧光信号,将物理信号转化为可分析的数字图像数据。

数字PCR系统:如Bio-Rad QX200 ddPCR系统,通过微滴生成与读取完成绝对定量分析。

激光共聚焦显微镜/荧光显微镜:用于观察和采集原位杂交(FISH)等实验产生的荧光信号图像。

激光捕获显微切割系统:在显微镜直视下从组织切片中精确分离并收集特定细胞群,用于后续分析。

生物分析仪/安捷伦2100系统:通过微流控芯片电泳快速评估RNA样本的完整性(RIN值)和浓度。

超微量分光光度计:如NanoDrop,用于快速微量测量核酸样本的浓度和纯度(A260/A280比值)。

低温高速离心机

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