本检测系统阐述了糖链结构表征测试的核心内容,涵盖关键的检测项目、广泛的检测范围、主流的分析技术以及必需的仪器设备。文章旨在为糖生物学、生物制药及食品科学领域的研究与质控人员提供一份全面的技术参考,深入解析从单糖组成到高级空间构象的完整糖链结构解析路径。

核心优势

检测中心实验室配备国内外的前沿分析检测设备,检测报告获得CNAS、CMA双重认证,国际互认。

检测流程

1 需求沟通
2 方案定制
3 取样/送检
4 实验检测
5 数据分析
6 出具报告

检测项目

单糖组成分析:定性及定量测定糖链中各种单糖(如葡萄糖、半乳糖、甘露糖等)的种类与摩尔比例,是结构解析的基础。

糖苷键连接方式分析:确定单糖之间通过何种羟基(如1-4, 1-6连接)以及α/β异头构型进行连接。

糖链序列测定:解析糖链中单糖残基的排列顺序,类似于蛋白质的氨基酸序列。

分支度分析:测定糖链结构的复杂程度,即主链上分支链的数量与位置。

分子量测定:获取糖链或糖缀合物(如糖蛋白)的精确或平均分子量。

末端糖基分析:鉴定糖链非还原末端的单糖种类,对生物活性有重要影响。

修饰基团鉴定:检测糖链上可能存在的硫酸化、磷酸化、乙酰化、甲基化等修饰基团。

高级结构分析:研究糖链在溶液中的空间构象、折叠方式及动态变化。

纯度与均一性评估:评估糖样品中目标糖链的纯度以及结构的一致性程度。

结合位点分析:对于糖蛋白,确定糖链与蛋白质骨架的具体连接位点(如Asn, Ser/Thr)。

检测范围

游离寡糖与多糖:如环糊精、壳聚糖、透明质酸、肝素等天然或合成多糖。

糖蛋白与糖肽:各类治疗性抗体、细胞因子、血浆蛋白等N-连接和O-连接糖蛋白。

糖脂:如神经节苷脂、脂多糖等含有糖链的脂类分子。

蛋白聚糖:由核心蛋白与一条或多条糖胺聚糖链共价结合的大分子。

天然产物提取物:从中药、植物、微生物中提取的具有生物活性的糖类化合物。

生物制药中间体与成品:疫苗、酶替代疗法药物、单克隆抗体等生物制品的糖链质控。

食品与保健品中的功能性多糖:如益生元、膳食纤维、香菇多糖等的结构鉴定。

细胞表面糖链:细胞膜上糖蛋白和糖脂的糖链结构,与细胞识别、信号传导相关。

合成寡糖与糖类似物:化学或酶法合成的特定结构寡糖及其衍生物。

发酵过程样品:发酵液中胞外多糖或重组糖蛋白的糖链结构监控。

检测方法

高效液相色谱法:利用不同色谱柱(如HILIC, RP)分离并分析糖链或酶解后的寡糖片段。

质谱法:包括MALDI-TOF MS和ESI-MS,用于精确分子量测定、序列分析及修饰鉴定。

核磁共振波谱法:特别是1D/2D NMR,是解析糖链精细结构(连接方式、构型)的黄金标准。

糖芯片技术:将多种糖链固定于芯片表面,用于高通量筛选糖结合蛋白的特异性。

毛细管电泳法:基于电荷和大小分离带电荷或衍生化后的糖链,分辨率高。

酶解序列分析:使用具有高度特异性的外切/内切糖苷酶逐步切割糖链,推断其结构。

荧光标记与电泳:如PAGE或CE结合荧光标记,用于高灵敏度分析寡糖图谱。

凝集素芯片/印迹:利用凝集素对特定糖结构的亲和性进行识别和半定量分析。

尺寸排阻色谱法:根据流体力学体积分离不同聚合度的多糖,评估分子量分布。

化学降解法:通过部分酸水解、Smith降解等化学方法获取结构信息片段。

检测仪器设备

高效液相色谱仪:配备多种检测器(RID, DAD, FLD),用于糖的分离与定量。

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪:适用于完整糖链、寡糖的快速分子量测定和谱图指纹分析。

电喷雾电离质谱仪:常与LC联用,实现在线分离与多级质谱碎片分析,用于序列解析。

核磁共振波谱仪:高场NMR是获得原子级别结构信息的关键设备,如600 MHz及以上型号。

毛细管电泳仪:配备紫外或激光诱导荧光检测器,用于高分辨率寡糖分离。

多糖序列分析系统:集成自动酶解、衍生化和分离检测的专用或模块化系统。

凝集素芯片扫描仪:用于读取凝集素芯片上荧光信号的专业激光共聚焦扫描仪。

尺寸排阻色谱-多角度激光光散射联用系统:直接测定多糖的绝对分子量及其分布。

傅里叶变换红外光谱仪:用于快速鉴别糖类官能团和初步结构表征。

超高效合相色谱系统:使用超临界CO2为主要流动相,为疏水性糖衍生物提供高效分离。

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